两种制备冷沉淀方法的比较

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1、两种制备冷沉淀方法的比较作者：杨玉峰，黄春萍，赵云，沈华仙【摘要】目的：通过对改良快速融化离心法和水浴虹吸法制备冷沉淀的质量比较，选择合适的制备冷沉淀的方法。方法：利用血凝分析仪检测冷沉淀中FⅧ和Fg的含量，电子称称量血袋重量并计算容量，计算三者的合格率。结果：改良快速融化离心法和水浴虹吸法的FⅧ含量(IU／袋)分别为：(86.75±24.91)、(62.91±22.87)，差异有显著性(P＜0．05)，合格率分别为：100％、91.7％，差异无显著性(P＞0．05)；Fg的含量(mg／袋)分别为：(142.1

2、6±27.53)、(117.91±31.99)，合格率均为：100％，差异无显著性(P＞0．05)；容量(ml／袋)分别为：(25.4±4.3)、(27.3±2.3)，合格率均为100％，差异无显著性(P＞0．05)。结论：两种方法都能制备出符合GB18469－2001《全血及成分血质量要求》的冷沉淀，但改良快速融化离心法制备的冷沉淀FⅧ含量要优于水浴虹吸法。【关键词】冷沉淀；凝血因子Ⅷ；纤维蛋白原；容量；质量标准　　冷沉淀是目前临床常用的一种血液成分，是新鲜冰冻血浆在1℃～5℃的条件下不溶解的白色沉淀物，其主

3、要含有凝血因子Ⅷ（FⅧ），纤维蛋白原（Fg）、vW因子(vonWillebrandfactor)、凝血因子ⅩⅢ（FⅩⅢ7），以及纤维结合蛋白（Fn）等成分。由于其中含有一些不稳定的凝血因子，特别是FⅧ因子，容易降低或失去活性，从而影响冷沉淀的质量。现将两种方法制备的冷沉淀质量情况，报告如下。　　1材料和方法　　1.1仪器和材料日本SysmexCA50自动血凝分析仪，试剂：德国DadeBehringMarburg公司生产（APTT,批号：537108；Owren'sVeronal缓冲液，批号：527634；乏因

4、子Ⅷ血浆，批号：536502A），苏州医用仪器厂的KJX一Ⅲ型冰冻血浆解冻箱,德国贺利氏6000i容量冷冻离心机，常熟双杰测试仪器厂生产的GαGDT1000电子称。　　1.2方法　　1.2.1原料血浆采集全血后6h内，3000g，4℃，10min，离心分离制备新鲜冰冻血浆（FFP），放入－50℃冰箱快速速冻后，置入－20℃以下的冰箱保存。冷冻24h以上的FFP用于制备冷沉淀［1］。　　1.2.2改良快速融化离心法将FFP放入(3±1)℃冰冻血浆解冻箱的恒温循环水槽中，待FFP融化到一半多时取出血浆袋,将还未融化

5、的血浆块捏散成碎冰块，加速其溶解，然后继续放入恒温循环水槽中融化，待剩少许碎冰块时,及时取出，3000g,0℃,107min离心,分离出上层血浆，下层(25±5)ml血浆和白色沉淀物即为冷沉淀，将其快速置于低温速度冰箱中冻结。　　1.2.3水浴虹吸法将联袋装有FFP袋子置于(3±1)℃冰冻血浆解冻箱的恒温循环水槽中，另一空袋悬于箱外，两袋之间有一定的落差。FFP融化时，由于虹吸的作用，融化的血浆流入空袋中，剩余的(25±5)ml的有白色结晶颗粒的血浆块即为冷沉淀，将其快速置于低温速度冰箱中冻结。　　1.2.4F

6、Ⅷ和Fg的检测方法按试剂说明书操作。　　1.2.5容量计算［2］。　　1.2.6质量标准按照GB18469－2001《全血及成分血质量要求》规定，由100mlFFP制备的冷沉淀(0.5u)：FⅧ含量≥40IU／袋，Fg含量≥75mg／袋，容量：(25±5)ml，符合质量标准者为合格。　　1.2.7统计学方法t检验和四格表的确切概率法。　　2结果　　2.1两种方法制备冷沉淀比较将随机抽取的24袋100mlFFP，随机分成两组，用上述两种方法分别进行检测，见表1。7　　表1两种方法制备冷沉淀三种指标比较（略）　　2

7、.2两种方法制备冷沉淀的三种指标合格率比较改良快速融化离心法制备的FⅧ含量合格率为100％（12/12），水浴虹吸法的FⅧ含量合格率为91.7％（11/12），两者差异无显著性（见表2）；两种方法检测的Fg含量均为100％的合格率，差异无显著性；两种方法制备的容量合格率也为100％，差异无显著性。　　表2两种方法制备冷沉淀合格率比较方法略　　2.3两种方法三相指标均合格的合格率比较符合GB18469－2001《全血及成分血质量要求》对冷沉淀的要求，改良快速融化离心法制备的冷沉淀合格率为100％，水浴虹吸法的为9

8、1.7％,差异无显著性。　　3讨论　　7　　冷沉淀通过静脉滴注、局部注入、局部喷洒或点滴、口服的方式，广泛应用于临床的甲型血友病、深度烧伤、肿瘤手术、皮肤、黏膜疾病、角膜疾病、弥散性血管内凝血（DIC）、多发伤和手术创伤、自发性气胸等的治疗［3］。冷沉淀的质量好坏在临床疗效中取到了至关重要的作用，因此选择好的制备方法也是非常关键的。根据本文检测结果显示，改良快速融化离心法同水浴虹吸法所