两种制备冷沉淀方法的比较

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1、两种制备冷沉淀方法的比较作者:杨玉峰,黄春萍,赵云,沈华仙【摘要】目的:通过对改良快速融化离心法和水浴虹吸法制备冷沉淀的质量比较,选择合适的制备冷沉淀的方法。方法:利用血凝分析仪检测冷沉淀中FⅧ和Fg的含量,电子称称量血袋重量并计算容量,计算三者的合格率。结果:改良快速融化离心法和水浴虹吸法的FⅧ含量(IU/袋)分别为:(86.75±24.91)、(62.91±22.87),差异有显著性(P<0.05),合格率分别为:100%、91.7%,差异无显著性(P>0.05);Fg的含量(mg/袋)分别为:(142.16±27.53)、(117.91±31.99),合格率均为

2、:100%,差异无显著性(P>0.05);容量(ml/袋)分别为:(25.4±4.3)、(27.3±2.3),合格率均为100%,差异无显著性(P>0.05)。结论:两种方法都能制备出符合GB18469-2001《全血及成分血质量要求》的冷沉淀,但改良快速融化离心法制备的冷沉淀FⅧ含量要优于水浴虹吸法。【关键词】冷沉淀;凝血因子Ⅷ;纤维蛋白原;容量;质量标准  冷沉淀是目前临床常用的一种血液成分,是新鲜冰冻血浆在1℃~5℃的条件下不溶解的白色沉淀物,其主要含有凝血因子Ⅷ(FⅧ),纤维蛋白原(Fg)、varburg公司生产(APTT,批号:537108;Oin,离心分离

3、制备新鲜冰冻血浆(FFP),放入-50℃冰箱快速速冻后,置入-20℃以下的冰箱保存。冷冻24h以上的FFP用于制备冷沉淀[1]。  1.2.2改良快速融化离心法将FFP放入(3±1)℃冰冻血浆解冻箱的恒温循环水槽中,待FFP融化到一半多时取出血浆袋,将还未融化的血浆块捏散成碎冰块,加速其溶解,然后继续放入恒温循环水槽中融化,待剩少许碎冰块时,及时取出,3000g,0℃,10min离心,分离出上层血浆,下层(25±5)ml血浆和白色沉淀物即为冷沉淀,将其快速置于低温速度冰箱中冻结。  1.2.3水浴虹吸法将联袋装有FFP袋子置于(3±1)℃冰冻血浆解冻箱的恒温循环水槽中

4、,另一空袋悬于箱外,两袋之间有一定的落差。FFP融化时,由于虹吸的作用,融化的血浆流入空袋中,剩余的(25±5)ml的有白色结晶颗粒的血浆块即为冷沉淀,将其快速置于低温速度冰箱中冻结。  1.2.4FⅧ和Fg的检测方法按试剂说明书操作。  1.2.5容量计算[2]。  1.2.6质量标准按照GB18469-2001《全血及成分血质量要求》规定,由100mlFFP制备的冷沉淀(0.5u):FⅧ含量≥40IU/袋,Fg含量≥75mg/袋,容量:(25±5)ml,符合质量标准者为合格。  1.2.7统计学方法t检验和四格表的确切概率法。  2结果  2.1两种方法制备冷沉淀

5、比较将随机抽取的24袋100mlFFP,随机分成两组,用上述两种方法分别进行检测,见表1。  表1两种方法制备冷沉淀三种指标比较(略)  2.2两种方法制备冷沉淀的三种指标合格率比较改良快速融化离心法制备的FⅧ含量合格率为100%(12/12),水浴虹吸法的FⅧ含量合格率为91.7%(11/12),两者差异无显著性(见表2);两种方法检测的Fg含量均为100%的合格率,差异无显著性;两种方法制备的容量合格率也为100%,差异无显著性。  表2两种方法制备冷沉淀合格率比较方法略  2.3两种方法三相指标均合格的合格率比较符合GB18469-2001《全血及成分血质量要求

6、》对冷沉淀的要求,改良快速融化离心法制备的冷沉淀合格率为100%,水浴虹吸法的为91.7%,差异无显著性。  3讨论    冷沉淀通过静脉滴注、局部注入、局部喷洒或点滴、口服的方式,广泛应用于临床的甲型血友病、深度烧伤、肿瘤手术、皮肤、黏膜疾病、角膜疾病、弥散性血管内凝血(DIC)、多发伤和手术创伤、自发性气胸等的治疗[3]。冷沉淀的质量好坏在临床疗效中取到了至关重要的作用,因此选择好的制备方法也是非常关键的。根据本文检测结果显示,改良快速融化离心法同水浴虹吸法所制备的FⅧ含量(P<0.05)差异有显著性,Fg含量(P>0.05)和容量(P>0.05)差异无显著性,在

7、三相指标均合格的合格率上改良快速融化离心法高于水浴虹吸法,但差异无显著性。FⅧ含量差异有显著性可能是水浴虹吸法在FFP溶解的过程中,冷沉淀有时不能形成大的凝聚团块,或成絮状,不能聚集吸附在中央未融化的冰块上或袋壁上,有部分往往由于虹吸作用而流到另一转移空袋中,降低了FⅧ含量。而Fg为较稳定的凝血因子,受制备时间和制备温度的影响较小,因此Fg含量差异无显著性。在用改良快速融化离心法时,容量控制取决于离心前冰渣的量,冰渣剩余过多,不能转移到另一联袋中,冷沉淀容量过大,冰渣过少影响冷沉淀的沉积,需要一定的操作经验才可以控制好容量;而虹吸法,只需计算出虹吸出

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