子宫腺肌病中孕激素受体亚型表达的研究

《子宫腺肌病中孕激素受体亚型表达的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、子宫腺肌病中孕激素受体亚型表达的研究　　【摘要】目的研究子宫腺肌病中孕激素受体亚型的表达，探讨孕激素受体亚型(hPR)在子宫腺肌病发病中的作用机制。方法运用免疫蛋白印迹法(Westernblot)和RT-PCR方法测定子宫腺肌病患者（24例）病灶及其在位内膜及对照组（19例）子宫内膜标本中孕激素受体亚型在蛋白和mRNA水平的表达，计算机图像分析、半定量研究孕激素受体亚型的表达。结果子宫腺肌病异位内膜中hPRs的表达均明显低于在位内膜和对照组，研究组在位或异位内膜中，hPR-A含量均高于hPR-B；而在mRNA水平上则差异无统计学意义(P>0．05)。结论子宫腺肌病异位内膜hPRs蛋白

2、的表达均明显低于在位内膜，而在mRNA水平上却无显著性差异；hPR蛋白的活性可能受转录后调节。　　【关键词】子宫腺肌病；人孕激素受体亚型；免疫蛋白印迹法；反转录聚合酶链反应　　　　【Abstract】ObjectiveTostudytheexpressionandthemechanismofhumanprogesteronereceptor(hPR)isoformsinadenomyosis.MethodsWesternblotandRT-PCRwereemployedtoinvestigatetheexpressionofhPRisoformsinectopiclesionfroma

3、denomyosisandnormalendometriumfromcontrols.ComputerdensitomitrywasusedtostudytherelativeexpressionofthehPRisoformsatproteinandmRNAlevels.ResultsTheexpressionsofhPRisoformsarelowerinadenomyosisthanin7endometrium(P<0．05).TheconcentrationofhPR-AwashigherthanthatofhPR-Binbothadenomyosisandendometri

4、um.(P<0．05).ConclusionTheexpressionsofhPRisoformsarelowerinadenomyosisthaninendometrium.NosignificantdifferencewasfoundbetweenthePR-mRNAinthesetwotissues.OurdatasuggestthatPRactivitycanberegulatedpost-transcriptionally.　　【Keywords】Adenomyosis;Humanprogesteronereceptorisoforms;Westernblot;RT-PC

5、R　　　　子宫腺肌病（adenomyosis）是指子宫内膜腺体及间质侵入子宫肌层并在其中生长所致，其明显的临床症状严重地影响生育年龄妇女的健康。虽然，它表现为一种性激素依赖性疾病，但是，具体的病因和发病机制目前尚未完全明确。研究发现，临床上该疾病孕激素治疗仍存在着疗效反应差的现象，而孕激素受体拮抗剂米非司酮对子宫腺肌病有一定的治疗作用[1]，推测可能由于孕激素受体亚型（hPR）存在着不同的转录活性及其组织特异性所致。本研究通过对子宫肌瘤中孕激素受体亚型的表达，探讨其在子宫腺肌病发病中的作用及可能的耐药机制。　　1资料和方法　　1．1一般资料7收集2006年2月至2007年10月在徐州

6、医学院附属医院妇产科，因子宫腺肌病行全子宫切除术患者的标本24例作为研究组，平均（43．7±4．3）岁；另取同期住院因子宫肌瘤或宫颈病变行子宫切除19例作为对照组，平均（44．3±5．4）岁。两组均为绝经前妇女，有临床症状但月经周期规律，术前至少6个月未接受性激素治疗，通过末次月经时间和术后子宫内膜病理证实为增殖期。两组患者在年龄上差异无统计学意义(P>0．05)。　　1．2方法　　1．2．1标本处理取研究组患者在位子宫内膜和异位病灶组织、对照组子宫内膜组织各0．5g低温（-70℃）冻存。分别行组织蛋白及总RNA的提取。　　1．2．2主要试剂和引物小鼠抗人孕激素受体单克隆抗体，

7、北京市肿瘤所免疫室提供；生物素化羊抗小鼠Ig-G，华美生物公司；辣根酶标记链亲和素，中山生物公司；中分子量蛋白标准及DAB显色试剂盒，华美生物公司。Trizol试剂盒，Gibco公司；逆转录酶MML-V，Promega公司；Taq酶，Promega公司；随机引物，Promega公司；dNTP，BoehringereMannheim公司；PCR分子量标准，华美生物公司。根据孕激素受体的cDNA序列[2]，应用赛百盛公司的引