蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性

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1、蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性张韵（浙江大学医学院附属第一医院浙江杭州310006）目的应用微机生物信号采集处理系统测定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位，观察刺激、神经损伤、药物对神经兴奋性、兴奋传导的影响并探讨其机制。1材料和方法1.1实验动物蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，ZhuoshanToad）1.2药品任氏液，氯化钾1.3器材RM6240微机生物信号处理系统（成都仪器厂）、神经干标本盒。1.4坐骨神经干制备蟾蜍毁脑脊髓，去上肢和内脏，下肢剥皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上，剪去尾椎；标本腹面向上，用玻璃分针分离脊柱两侧神经丛，用线在近

2、脊柱处结扎，剪断神经；将神经干从腹面移向背面。标本背面向上固定，从大腿至跟腱分离坐骨神经。坐骨神经标本置任氏液中备用。1.5仪器连接和参数神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道。仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3KHz、灵敏度5mV，采样频率：100KHz，扫描速度：0.2ms/div。单刺激激方式，刺激幅度1.0V，刺激波宽0.1ms，延迟2ms，同步触发。1.6动作电位引导神经干标本置于标本盒的电极上，神经与电极接触良好，调节刺激电压，记录动作电位。2观察2.1观察中枢端复合动作电位（compoun

3、dactionpotention，CAP）用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干末梢端，观察中枢端CAP正、负向振幅(amplitude，A)和时程(duration，D)。2.2测定双相动作电位（biphasicactionpotential,BAP）用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定末梢端BAP正相振幅（Ap1）、正相时程（Dp1）、正相振幅（Ap2）、正相时程（Dp2）。2.3传导速度测定用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间

4、差Δt，根据V＝SR1-R2-/Δt计算出AP的传导速度。2.4测定单相动作电位（monophasicactionpotential，MAP）用镊子夹伤对1对引导电极间的神经干，然后用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定末梢端MAP振幅（Am）和时程（Dm）。2.5观察刺激强度与动作电位振幅的关系刺激波宽0.1ms，刺激电压从0.1V开始，按步长0.05V增加，刺激电压每增加一次刺激神经干一次，并记录刺激电压和MAP振幅。测定阈刺激（Uth）和最大刺激（Umax）。2.6测定KCl处理前后MAP振幅刺激电压1.0V

5、，刺激波宽0.1ms，将3mol/LKCl滤纸置于第1对引导电极的第一电极处，记录KCl处理前，处理后5min时MAP的振幅（Aap）。3结果3.1阈刺激和最大刺激电刺激，波宽0.1ms时，阈刺激0.31±0.11V；最大刺激0.67±0.31V，刺激电压1.0V时，动作电位的传导速度为31.39±2.65（m/s）。3.2刺激强度与动作电位振幅的关系在刺激电压低于0.31±0.11V时，测不到动作电位；刺激电压从0.31±0.11V增加至0.67±0.31V，动作电位振幅呈曲线增长，刺激电压高于0.67±0.31V动作电位振幅不再增长，见

6、图1。图1刺激强度与动作电位振幅的关系3.2BAP振幅和时程刺激电压1.0V，波宽0.1ms时，动作电位正相振幅（4.65±2.01mV）显著大于负相振幅（2.49±1.13mV）（p<0.01）；动作电位正相时程Dp1±sms显著短于负相时程`Dp2±sms（p<0.01），见表1。3.3MAP振幅和时程刺激电压1.0V时，单相动作电位振幅`Am±smV大于双相动作电位正相振幅Ap1±smV（p<0.05）；单相动作时程Dm±sms显著长于双相动作电位正相Dp1±sms（p<0.01），见表1。表1蟾蜍坐骨神经干末梢端引导的双相动作电位与

7、单相动作电位sampleAp1(mv)Ap2(mV)Dp1(ms)Dp2(ms)Am(mV)Dm(ms)18.634.461.101.6011.641.6323.012.151.122.024.632.6733.631.391.011.484.682.0144.453.120.801.125.341.4153.931.651.071.314.322.0264.272.171.081.525.612.52`x±s4.65±2.012.49±1.13**1.02±0.111.51±0.30##6.04±2.79*2.04±0.49##注：*:p

8、<0.05，**:p<0.01与Ap1比；#:p<0.05，##:p<0.01与Dp1比3.53molKCl对神经干AP影响刺激电压1.0V，3molKCl处理前，动作电位振幅为