蟾蜍坐骨神经干动作电位记录及性质分析.docx

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1、蟾蜍坐骨神经干动作电位记录及性质分析实验目的：1.制备蟾蜍坐骨神经干标本2.记录神经干动作电位，获得其阈强度、顶强度、传导速度、相对不应期等性质，观察复合动作电位、阳极电紧张、单相动作电位等现象。3.与单细胞动作电位对照，加深理解神经电学性质。实验过程：1.预习材料、软件、数据下载地址：ftp.bio.pku.edu.cn/track，用户名和密码均为SLX。2.自行观看教学短片，了解坐骨神经干标本制备方法。3.每人制备一条尽量长的坐骨神经干标本。4.两人一组进行实验。a)将神经干放置在神经肌肉标本盒内，用任氏液保持神经干湿润（可使用任氏液浸湿的棉球放在标本盒中并盖上盖子）。

2、b)连接刺激输出，负极（黑色）靠内侧，正极（红色）靠外侧。c)连接生理记录仪，负极（绿色）靠内侧，正极（红色）靠外侧，连接地线（黑色）。5.记录数据，按下列步骤进行实验（软件操作说明见附图）：a)数据采集：在E盘建立目录，禁止将数据文件存放在桌面上，记录文件后切记使用“文件---另存为”命名并保存，不要直接使用“保存”按钮。b)设置参数：采样频率100kHz，扫描速度0.2ms/div，灵敏度自定，时间常数0.02s，滤波3kHz，刺激器使用同步触发。c)阈强度和顶强度：设置刺激波宽为0.1ms，使用强度递增刺激，初始强度0V，增量0.01V，延迟20ms，组间延迟4s，使用

3、重叠显示，偏移量0，显示强度刺激标注。观察动作电位波形，使用峰值幅度对刺激强度作图，得到阈强度和顶强度。d)刺激波宽与阈强度的关系：选择若干刺激波宽，分别测定其阈强度数值，使用阈强度对波宽作图，分析其反比关系e)动作电位的传导速度：根据刺激与动作电位开始之间的潜伏期以及刺激电极负极与记录电极负极之间的距离，计算动作电位的传导速度；或者将记录电极分别放在两个较远的距离上，计算其动作电位的时间差，计算传导速度。f)观察阳极电紧张现象：将刺激电极正负极位置调换，重新测定阈强度和顶强度，与正常位置下的数据进行对比并分析原因。g)将记录电极正负极对换，使用顶强度记录双相动作电位，与正常

4、连接下的记录对比，分析其原因。h)单相动作电位：在记录电极正负极之间用镊子用力夹神经干，破坏其传导，记录单相动作电位。i)相对不应期：使用顶强度连续进行两次同样的刺激，不断减少刺激的间隔，通过分析两次单相动作电位的幅度比值对刺激间隔作图，确定相对不应期长度。6.整理所需数据文件目录，放入“桌面---大实验”文件夹中，可从ftp下载数据。7.实验完毕，将手术器械清洗干净并擦干，其余装置恢复原状，检查签字后离开实验室。课程时间为5学时，18:00前应完成实验并离开。8.在ftp下载并安装生理记录软件，启动软件后显示错误对话框，按住ctrl键并单击对话框下的“确定”按钮，可启动软件

5、并进行数据分析。9.实验报告：按照科学论文格式写作，要求言简意赅，表达清晰。Word版本的实验报告在3月29日前交给助教老师。数据截图要求使用“鼠标捕捉”功能，并确认图象左上角的防伪码正确。