细胞色素c的制备与相对分子质量的测定

《细胞色素c的制备与相对分子质量的测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、细胞色素c的制备与相对分子质量的测定钟日龙(2009316044)赵炀（山西大学生命科学学院山西太原市坞城路92号邮编：030006）摘要氧化型细胞色素C在408nm、530nm有最大吸收峰，还原型细胞色素C在415nm、520nm和550nm有最大吸收峰。550nm处的磨尔消光系数为2.77×l04moL/m。其中还原型最稳定，实验中所获得的细胞色素产品是氧化型和还原型的混合物。经氧化剂或还原剂处理，可变为单一种型。测定其中一种的光吸收，根据磨尔消光系数，即可计算出细胞色素C的含量。根据生物大分子所带电荷量和大小不同，利用SDS-聚病稀酰的胺凝胶电泳测定细胞色

2、素C的相对分子质量关键词细胞色素C制备相对分子质量电泳法测定中国分类号：文献识别码：文章编号：PreparationofcytochromecandmolecularweightdeterminationZhongRiLong(2009316044)ZhaoYang(CollegeofLifeScience,ShanxiUniversityTaiyuan,ShanxiProvinceNo.92DockRoad,CityZip:030006)SummaryofoxidizedcytochromeCinthe408nm,530nmmaximumabsorptionp

3、eakofreducedcytochromeCat415nm,520nmand550nmabsorptionmaximum.Seoulmillat550nmextinctioncoefficient2.77×l04moL/m.Whichisalsothemoststableprototypeexperimentintheproductobtainedisoxidizedcytochromeandalsotheprototypeofthemixture.Byoxidizingorreducingagenttreatment,intoonesingletype.On

4、emeasurementoflightabsorption,extinctioncoefficientbasedongrindingSeoul,youcancalculatethecytochromeCcontent.AccordingtothechargeofbiologicalmacromoleculesamountandsizeofthedifferentrarediseasesusingSDS-polyamineacidgelelectrophoresisofcytochromeC,molecularweightKeywordscytochromeCpr

5、eparationelectrophoresisfordeterminationofmolecularweight正文1.前言细胞色素C是有效的电子传递体，对因组织缺氧引起的一系列症状，起到矫正细胞呼吸与物质代谢作用。临床上细胞色素C7主要用于治疗因组织氧化还原过程障碍及因组织缺氧所引起的一系列疾病，如改善脑血管障碍、脑出血、脑外伤、脑动脉硬化、脑栓塞、中风后遗症等引起的氧缺乏等症状；治疗一氧化碳中毒、催眠剂中毒、新生儿假死、视神经症以及因心脏代谢障碍、心绞痛引起的心肌组织缺氧等。也可应用细胞色素C治疗因支气管哮喘和慢性肺炎所致的肺功能不全。有报道对进行性肌肉萎

6、缩症也有较好疗效。其肠溶衣口服片对放疗和化疗引起的白细胞降低等也有改善作用。细胞色素是只存在于需氧细胞中。细胞色素在线粒体内膜上起传递电子的作用。细胞色C(cytochromec)是细胞色素一种。它在线粒体呼吸链上位于细胞色素B和细胞色素氧化酶之间，是呼吸链的一个重要组成部分。细胞色素C是一种稳定的可溶性蛋白，耐热、酸碱，不易变性。细胞色素C，相对分子质量约为13000，蛋白质部分由104个左右的氨基酸残基组成。它溶于水，在酸性溶液中溶解度更大，故可自酸性溶液中提取。其制品分为氧化型和还原型两种，前者水溶液呈深红色，后者水溶液呈桃红色。细胞色素C对热、酸和碱都比

7、较稳定，但三氯乙酸和乙酸可使之变性，引起失活。吸附剂通常在微酸性(pH5~6)或低盐溶掖中吸附蛋白质。吸附于吸附剂上的蛋白质在微碱性或较高改浓度条件下即可洗脱下来。还原型细胞色素C波长520nm处有最大吸收值，根据这一特性作出一条标准细胞色素C浓度和对应的光密度值的标准曲线，然后根据测得的待测样品溶液的光密度值就可以由标准曲线的斜率求出待测样品的含量。根据生物大分子所带电荷量和大小不同，利用SDS-聚病稀酰的胺凝胶电泳测定细胞色素C的相对分子质量。细胞色素C在动物心肌和酵母中含量丰富，可作为实验材料。所以本实验以新鲜猪心脏为材料。1.实验部分2．1主要实验器材与

8、试剂绞肉机；电磁搅拌器；