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《响应面优化脂肽生物合成条件实验方案1》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、课题响应面优化枯草芽孢杆菌生产生物表面活性剂lipopeptide发酵条件一、测定方法1脂肽浓度与表面张力的关系测定0~900mg/L脂肽表面活性剂纯品溶液的表面张力。由图1可知,脂肽溶液的表面张力随脂肽浓度增大逐渐降低,当脂肽溶液的表面张力降至34.1mN/m后,表面张力不再随脂肽浓度的增大而降低,基本保持不变,此时对应的脂肽质量浓度500mg/L即为临界胶束浓度。图1 表面张力与脂肽质量浓度关系图Fig.1 Therelationofsurfacetensionandlipopeptideconcentration对0~500mg
2、/L脂肽溶液质量浓度与表面张力进行线性回归,得线性回归方程:y=-0.0738x+71.257,线性相关系数R2=0.996。可见脂肽质量浓度与表面张力有良好的线性关系,可以通过表面张力表示脂肽含量。（张凡,佘跃惠.排油圈法对生物表面活性剂的定性与定量[J].化学工程师,2005(1):14-16.）2生物量的测定将全培养液于3000r/min离心20min,离心菌体用无菌水冲洗后再次离心,冲洗两遍溶解于相同体积的蒸馏水中,稀释10倍后(稀释倍数可能会有变化),在580nm下测得吸光度值,用OD580表征生物量,每个样品测定三次（结果
3、为测定结果乘以稀释倍数）。刘佳,黄翔峰,陆丽君,等响应面法优化Alcaligenessp.产脂肽生物破乳剂培养基的研究[J].工业微生物,2008,38(5):40-443表面张力测定拉脱法发酵离心取上清液测表面张力环脂肽生产菌株BacillussubtilisOw-097生物合成条件[J].江苏调味副食品,2009(03):11-15,21二试验方法1MinRunEquirelicatedResIV设计(主效因子的筛选方法)培养基其它成分（100ml）：磷酸二氢钾0.2g,磷酸氢二钠0.8g，硫酸镁0.03MinRunEquirel
4、icatedResIV设计试验因素水平表ExperimentalvariablesandlevelsforMinRunEquirelicatedResIVdesign因素单位符号编码水平实际水平-1+1低水平高水平可溶性淀粉%X1x-1x+116酵母粉%X2x-1x+10.040.08发酵时间hX3x-1x+12448pHX4x-1x+17.09.0接种量%X5x-1x+126装瓶量xml/300mlX6x-1x+1501002爬陡坡试验表4最陡爬坡试验*序号步长可溶性淀粉(x1)酵母粉(x2)装瓶量(x3)接种量(x4)脂肽产量ug
5、/ml1x50.069052x+Δxi60.0810063x+2Δxi70.1011074x+3Δxi80.1212085x+4Δxi90.1413096x+5Δxi100.1614010*要确定原点数值和步长(Δx1=+1%、Δx2=+0.02%、Δx3=+10ml、Δx4=1%)培养基其它成分为：100ml装瓶量含磷酸二氢钾0.2g,磷酸氢二钠0.8g，硫酸镁0.03，发酵时间为48h，pH为7.5.3二次回归旋转中心复合设计(quadraticrotatablecentralcompositedesign)实例如下CCD中的r计
6、算实例一般地，设有p个因素Z1,Z2,…，Zp，其指标y在一定的范围内可近似地用二次函数描述，则其二次回归正交组合设计可按下述方法进行：(1)确定各因素的变化范围。以Z1j和Z2j分别表示因素Zj(j=1,2,…,p)变化的上限和下限，并用下式计算各因素的零水平(Z0j)和变化区间(△j)：(1)(2)对每个因素的水平进行编码，编码时线性变换按(1)式 进行。需要指出的是在这里因素Zj的上下水平对应的不是+1和-1，而是r和-r，每个因素也不是三个水平，而是以下五个水平：实例对于因素X1(温度)而言，Z1j和Z2j分别表示因素变
7、化的上限和下限(因素Zj的上下水平对应的不是+1和-1,而是r和-r),即Z2j=40(r),Z1j=20(-r).所以：(张秋华,张敏,张亚丽.二次回归正交旋转组合设计优化单细胞蛋白饲料的研究[J].饲料工业,2009,30(17):20~23)
