复方丹参注射液对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用.doc

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1、复方丹参注射液对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用作者：任香善，宋京郁，林贞花，任香玉，高英兰，金贤国［摘要］［目的］探讨复方丹参注射液对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用及其机制.［方法］用过氧化氢损伤内皮细胞，MTT法检测其存活率，分光光度法检测细胞培养上清液中的MDA含量，免疫细胞化学染色法检测细胞表面细胞间ICAM-1的表达.［结果］血管内皮细胞受到氧化损伤后，细胞存活率明显降低，MDA含量明显增加，细胞间ICAM-1表达明显增加，而预先加入复方丹参注射液可改善上述结果.［结论］复方丹参注射液通过其抗脂质过氧化作用，对氧化损伤的血管内皮细胞具有保护作用.［关键词］内皮，血管;创伤和损伤;丹参;

2、丙二醛ABSTRACT:OBJECTIVEToexploretheprotectiveeffectsofthecompoundDansheninjectiononthevascularendothelialcells（VECs）injuredbyoxidizationanditsmechanismsofanti-oxidization.METHODSByusingprimarycultureofnewbornumbilicalveinendothelialcells（UVECs）invitro，theUVECswereinjuredbyH2O2.TheviabilityofVECswasmea

3、suredbyMethylthiazoiyltetrazolium（MTT）assay.ThecontentsofMDAinthesuspensionofcellcultureweredetectedbyspectrophotometer，andtheexpressionofintercellularadhesionmolecule-1（ICAM-1）weredetectedbyimmunocytochemistry.RESULTSAfterVECswereinjuredbyoxidization，cellviabilitieswereobviouslydecreased，butMDAcont

4、entandtheexpressionofICAM-1wereobviouslyincreased.TheabovephenomenoncouldbepreventedinsomedegreethroughaddingthecompoundDansheninjectioninadvance.CONCLUSIONThecompoundDansheninjectionhasprotectiveeffectsontheinjuredendothelialcellsinducedbyoxidizationthroughthefunctionofanti-lipidoxidization.Keyword

5、s:endothelium，vascular;woundsandinjuries;redsageroot;malondialdehyde动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是引发多种心脑血管疾病的直接病因，而许多研究结果表明血管内皮细胞（endothelialcell，EC）损伤又是AS发生的始动环节［1］.本实验采用过氧化氢制作血管内皮细胞氧化损伤模型后利用复方丹参注射液进行干预，以探讨复方丹参注射液的主要成分丹参对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用及其机制.1材料与方法41.1材料复方丹参注射液（含丹参1g/mL）为上海中西药液股份有限公司产品，批号为021001;M199培养

6、基为美国GIBCO公司产品;胎牛血清为美国HYCOLONE公司产品;过氧化氢（300mL/L，AR级）为天津开发区海晶精细化工厂产品，临用前稀释，并在5min内使用;MTT为SIGMA公司产品;MDA试剂盒由北京邦定生物技术有限公司提供;细胞间ICAM-1多克隆抗体由武汉博士德公司提供;ABC试剂盒为美国产品.　1.2方法1.2.1人脐静脉内皮细胞的培养及分组参照文献［2，3］的方法略加修改进行.在无菌条件下，取健康产妇分娩后6h以内的脐带，用1g/LⅠ型胶原酶10～15mL灌注，使之充盈，置于37℃水浴中孵育15～20min;收集含有细胞的酶液，放入离心管中，以1000r/min离心10mi

7、n，弃去上清液，往沉淀物中加入含有200g/LFBS、50U/mL肝素及终浓度为2mol/LL-谷氨酰胺的M199完全培养液5mL，充分混合制成细胞悬液，行4g/L台盼蓝染色，调整细胞数为1×108个/L，以（1.5～2.0）×108个/m2密度植入到培养瓶中，置于37℃，50mL/L二氧化碳培养箱中培养，定期换液，待细胞生长成融合状态后进行鉴定.血管内皮细胞在相差显微镜下可见为单层，互不重叠，呈