幽门螺杆菌黏唾液酸黏附素疫苗治疗小鼠幽门螺杆菌感染.doc

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1、幽门螺杆菌黏唾液酸黏附素疫苗治疗小鼠幽门螺杆菌感染作者：杨勤,杨明刚,董洋,EllenXind,史俊容【摘要】　　目的:利用人类幽门螺杆菌(H.pylori)感染的小鼠模型研究唾液酸黏附素疫苗治疗H.pylori感染的作用.方法：把已感染H.pylori的小鼠分成4组,分别通过灌胃方法给予唾液酸黏附素100μg加霍乱毒素CT2μg、单纯唾液酸黏附素100μg、单纯CT2μg或PBS,1次/wk,共4次,治疗结束后4wk处死动物,取胃粘膜行半定量细菌培养检查H.pylori情况.结果：治疗后各组H.pylori根除率分别为:唾液酸黏附素加CT组30%（3/10）、单纯唾液酸黏

2、附素组、单纯CT组及PBS组根除率均为0%.差异有统计学意义.未根除H.pylori的小鼠，唾液酸黏附素加CT组H.pylori的定植密度明显低于其它3组（P<0.05）.结论：唾液酸黏附素能够作为H.pylori多价治疗疫苗的组分之一.【关键词】幽门螺杆菌；唾液酸黏附素；克隆；免疫；疫苗　　ImmunizationtreatmentofHelicobacterpyloriinfectionwiththevaccinecomposedofsialicacidadhesinandCT:Ananimalmodelstudy【Abstract】AIM:Toinvestiga

3、tetheeffectsofthevaccineconsistingofHelicobacterpylori(H.pylori)sialicacidadhesinandcholeratoxin(CT)inthetreatmentofH.pyloriinfectioninaH.pyloriinfectedmousemodel.METHODS:TheC57BL/6miceinfectedwithH.pyloriweredividedinto4groups.Themiceofeachgroupwereimmunizedbysialicacidadhesin(100μg)plusC

4、T(2μg),sialicacidadhesin(100μg),CT(2μg),PBSorallyrespectively,onceaweekfor4weeks.Fourweeksafterlasttreatment,allanimalsweresacrificedandstomachbiopsieswerecollectedtodetectH.pyloribythesemiquantitativebacterialcultureassay.RESULTS:Theeradicationrateofthevaccinegroupwas30%（3/10）.Theeradica

5、tionratesoftheother3groupswereall0%.Thereweresignificantdifferencesintheeradicationrateamongthevaccinationgroupandtheother3controlgroups(P<0.05).Inaddition,theH.pyloricolonizeddensityofvaccinationgroupwassignificantlylowerthanthatofother3groups(P<0.05).CONCLUSION:Sialicacidadhesincou

6、ldbeaneffectivecomponentofH.pylorimultivalencevaccine.【Keywords】Helicobacterpylori;sialicacidadhesin;cloning;immune;vaccine4　　0引言我们已经构建了幽门螺杆菌（Helicobacterpylori,H.pylori）唾液酸黏附素的高效原核表达体系［1-2］，并对其进行了纯化及功能研究［3］.现通过建立感染H.pylori的小鼠模型观察唾液酸黏附素疫苗治疗H.pylori感染的作用，为H.pylori多价治疗性疫苗的研制奠定基础.1材料和方法1.1材料

7、无特定病原体（specificpathogenfree，SPF）C57BL/6小鼠30只，4wk龄，雄性，质量12~13g，饲养条件符合2级动物要求.纯化的重组唾液酸黏附素在以前的研究中已经制备；其余试剂为国产分析纯.H.pylori的固体培养：取冷冻保存的H.pylori菌种一环于固体培养基上连续划线接种，2h内置厌氧培养箱，37℃微需氧环境（O250mL/L,CO2100mL/L,N2850mL/L）中培养72h，湿度保持95％以上.H.pylori的菌落呈园形，凸起、光滑、灰白色、半透明，直径0.2~0.8