pH胁迫对中华绒螯蟹幼蟹生长的影响及其营养干预研究

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1、2018届研究生硕士学位论文分类号：Q958.8学校代码：10269密级：学号：51151300078硕士学位论文论文题目：pH胁迫对中华绒螯蟹幼蟹生长的影响及其营养干预研究院系：生命科学学院专业：动物学研究方向：水生动物营养学指导教师：陈立侨（教授）学位申请人：黄志鹏2018年4月完成Masterdegreethesisin2018UniversityCode:10269StudentID:51151300078EastChinaNormalUniversityTheeffectsofpHonthegrowthanditsinterventionwithnutritionalmetho

2、dsinjuvenileChinesemittencrabEriocheirsinensisDepartment:SchoolofLifeSciencesMajor:ZoologySpecialization:NutritionofAquaticAnimalsSupervisor:Prof.LiqiaoChenCandidate:ZhipengHuangApril2018硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名职称单位备注冷向军教授上海海洋大学答辩主席王群教授华东师范大学答辩委员杜震宇教授华东师范大学答辩委员乔芳工程师华东师范大学答辩秘书中文摘要中文摘要本论文以中华绒螯蟹幼蟹为研究对象，采用生

3、理生化研究方法，结合转录组分析，较系统地探究了pH胁迫对中华绒螯蟹生长性能、抗氧化能力和物质代谢的影响。在以上研究的基础上，有针对性地在饲料中补充抗应激的功能性添加剂，探寻缓解或消除pH胁迫因子的营养学方法。结果可为查明pH胁迫对中华绒螯蟹生长和生理代谢的不良影响提供参考，补充、完善虾蟹应激生理学方面的资料，同时还可为预防和控制中华绒螯蟹养殖生产中的pH胁迫提供基础资料，对促进河蟹产业的健康持续发展有重要的意义。1.pH慢性胁迫对中华绒螯蟹幼蟹生长性能、物质代谢的影响及肝胰腺转录组分析本试验旨在探究两种pH胁迫对中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)幼蟹的影响，以及幼蟹对pH胁

4、迫的响应和可能存在的适应机制。分别设置酸性pH胁迫组(pH6.5)，碱性pH胁迫组(pH9.5)和对照组(pH8.0)，养殖初重为2.10±0.20g的河蟹幼蟹，周期为8周。试验结果如下：酸性pH胁迫下，幼蟹的生长性能与对照组相比受到显著抑制。同时，幼蟹的耗氧率(OCR)显著高于对照组，排氨率(AER)则显著低于对照组。碱性pH胁迫下，幼蟹的增重率与对照组相比受到显著抑制。同时，幼蟹的耗氧率（OCR）显著高于对照组，排氨率（AER）则极显著低于对照组(p<0.01)。幼蟹肝胰腺转录组分析结果表明：与对照组相比，碱性pH胁迫组中有775个显著上调和870个显著下调基因，酸性pH胁迫组中有1

5、344个显著上调和1115个显著下调基因。转录组差异基因信号通路分析发现，碱性pH胁迫下，幼蟹肝胰腺中与蔗糖吸收，糖异生等碳水化合物代谢通路相关基因极显著下调(p<0.01)，而尿素代谢信号通路相关基因极显著性上调(p<0.01)。酸性pH胁迫下，幼蟹糖酵解，三羧酸循环，氧化磷酸化等通路相关的基因极显著性上调(p<0.01)。转录组数据表明，幼蟹在应对pH胁迫的过程中，机体或通过调节糖代谢和尿素代谢，进而改变体内氨氮离子浓度，以此来维持机体内外的酸碱平衡，但该结论仍需进一步验证。以上结果表明：慢性pH胁迫对中华绒螯蟹幼蟹的生长性能、呼吸和物质代谢等有显著的影响。而机体则1华东师范大学硕士

6、学位论文通过调节氨氮代谢方式或途径，调整蟹体内部酸碱平衡，以减少pH胁迫对机体生理机能的负面影响。2pH慢性胁迫下饲料中添加L-谷氨酰胺对中华绒螯蟹幼蟹生长、抗氧化能力和氨氮代谢的影响为探究L-谷氨酰胺对中华绒螯蟹幼蟹抗pH胁迫能力的影响，本研究在实用配方(蛋白质含量41.82%和7.52%脂肪含量)的对照组饲料中，添加0.5%L-谷氨酰胺，分别在三种pH环境(6.5，8.0和9.5)下，投喂初体重为0.26±0.04g的幼蟹，养殖周期为8周。试验结果如下：在酸性pH胁迫下，饲料中添加0.5%的L-谷氨酰胺能够显著提高幼蟹的生长率和饲料转化率，并显著提高了幼蟹肝胰腺中谷胱甘肽(GSH)的

7、活力。碱性pH胁迫环境下，添加L-谷氨酰胺能显著降低幼蟹肝胰腺中丙二醛(MDA)含量。同时，饲料中添加额外L-谷氨酰胺均显著降低了幼蟹的血淋巴氨浓度和尿素氮的浓度。96小时短期pH胁迫试验的结果，额外添加0.5%L-谷氨酰胺的处理组，幼蟹体内血淋巴氨氮浓度和肝胰腺尿素氮浓度均发生了显著变化，证明在环境pH胁迫下，中华绒螯蟹幼蟹机体内通过+谷氨酰胺代谢途径，调节体内氨分子(NH3)浓度和铵离子(NH4)浓度平衡，以此来稳定机体酸碱平衡