中华绒螯蟹幼蟹对leu和ile的需要量研究

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时间:2018-05-01

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1、中华绒螯蟹幼蟹对Leu和Ile的需要量研究  亮氨酸(Leu)和异亮氨酸(Ile)是水产动物体内不能合成而必须从饲粮中获取的氨基酸,即必需氨基酸(EAA),都属于脂肪族氨基酸,同时也都是支链氨基酸(BCAA)。它们特殊的结构和功能在生命代谢中占有特别重要的地位。亮氨酸是BCAA中唯一的生酮氨基酸,刺激胰岛细胞释放胰岛素,和缬氨酸、异亮氨酸一起可以起到保护肌肉的作用。亮氨酸的主要氧化部位在肌肉,是合成机体蛋白质的原料,可以抑制蛋白降解和促进肌肉蛋白合成;对血红蛋白合成和维持血糖水平以及激素的增加有重要作用;亮氨酸的缺乏可

2、能引起严重的缺乏症状如生长的阻滞。而异亮氨酸是合成动物体激素和酶类的原料,具有促进蛋白质合成和抑制其分解的作用。目前,国内外学者已经开展了一些水产动物对Leu和Ile营养需求的研究,确定了虱目鱼(ChanoschanosForsskal)、斑节对虾(Penaeusmonodon)、印度鲮(Cirrhinusmrigala)、草鱼(Ce-nopharyngodonidellus)、建鲤(Cyprinuscarpiovar.Jian)、凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)等多种鱼虾的亮氨酸和异亮氨酸需求量。

3、  中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis),俗称河蟹、大闸蟹,属节肢动物门甲壳纲,是我国特有的淡水珍品。  目前,关于中华绒螯蟹对氨基酸需求的研究仅限于赖氨酸、蛋氨酸和精氨酸。本试验以中华绒螯蟹幼蟹为研究对象,以幼蟹的生长性能及肌肉必需氨基酸含量等为评价指标,研究饲料中不同水平的Leu或Ile对中华绒螯蟹生长的影响,旨在获得中华绒螯蟹幼蟹对Leu和Ile的需要量,以期完善中华绒螯蟹对十种必需氨基酸需要量的数据库,为研制中华绒螯蟹营养平衡的人工配合饲料提供理论依据。  1材料与方法  1.1试验用蟹  试验蟹苗

4、购自上海市崇明岛长江口中华绒螯蟹养殖基地,采用经过沉淀、过滤后的天然池塘水进行养殖。水泥池中暂养一周,挑取体重均一、附肢完整的幼蟹作为试验对象。采用底面为长方形(60cm85cm,水容量300L)的白色塑料水箱,箱内水深约30cm,每箱40只幼蟹,初始体重为(0.90±0.02)g,水箱内放置足够数量的X片及圆形PVC管作为隐蔽物。  1.2试验饲料  采用单因子试验设计方法,为了使基础饲料中目标氨基酸(Leu或Ile)含量尽可能低,因此分别采用不同的饲料配方,以酪蛋白、明胶、鱼粉为蛋白源,糊精、玉米淀粉

5、为糖源,鱼油、豆油、卵磷脂为脂肪源制成基础饲料。基础饲料配方和营养组成见表1,氨基酸组成模式参照王树英和陈辉测定的河蟹肌肉氨基酸含量(表2)。每个试验分别设6个氨基酸浓度梯度,每个浓度3重复。饲料中Leu添加梯度为0、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%、2.0%,实测各组饲料Leu含量为0.87%、1.26%、1.64%、2.03%、2.39%和2.81%;饲料中Ile添加梯度为0、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%和2.5%,实测各组饲料Ile含量为0.69%、1.21%、1.70%、2.19%、2.70%和

6、3.21%(表3)。  在试验饲料制作时,先将原料粉碎,使原料粉末能全部通过60目试验筛,再按比例充分混匀后加适量水搅拌,通过绞肉机挤成直径1.5mm的长条,风干后,破碎成粒径为(12)mm的破碎料,置于4℃冰箱内密封保存备用。    1.3饲养管理  采用表观饱食投喂法,每天于上午八点和下午五点投喂两次,次日吸污并补充养殖用水。此外,每周定期测定水质情况,水温(2832)℃、溶解氧>5mg/L、氨氮<0.1mg/L、pH6.87.2,连续充气增氧,实验周期60d。  1.4样品采集与分析  试验期间,河蟹

7、因脱壳或相互残杀死亡后及时捞出,并精确称重,其增重部分不计入试验结果。试验结束后,停食24h,捞出全部河蟹,尽量沥干水分,称重。一部分烘干后作全蟹样品,用于常规生化分析;一部分提取肌肉样品,滤纸吸干水分后用于氨基酸含量的测定。测定指标包括水分、粗蛋白质、粗脂肪、灰分以及氨基酸含量,分别采用105℃恒重法、凯式定氮法、索氏抽提法、550℃马福炉灼烧法以及氨基酸自动分析仪。  计算公式:特定生长率(SGR,%/d)=(Ln结束时平均体重–Ln开始时平均体重)/试验天数100;成活率(SR,%)=实验结束后试验蟹

8、数目/实验开始时试验蟹数目100。  1.5数据分析  试验数据采用平均值±标准差(Mean±SD)表示,采用SPSS20.0软件包对所得数据进行单因素方差分析(One-;EAA)、非必需氨基酸总量(∑NEAA)、氨基酸总量(TAA)有显着性影响(P<0.05),对其他氨基酸影响不显着(P

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