Survivin与其异构体Survivin-2B在膀胱癌中的表达及意义.doc

《Survivin与其异构体Survivin-2B在膀胱癌中的表达及意义.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、Survivin与其异构体Survivin-2B在膀胱癌中的表达及意义【摘要】目的分析Survivin及其异构体Survivin-2B在膀胱癌组织中的表达，并探讨其潜在的临床意义。方法用实时定量RT-PCR法检测56例膀胱癌患者的肿瘤组织（试验组）和12例膀胱非恶性肿瘤组织（对照组）中SurvivinmRNA，Survivin-2BmRNA的表达情况。结果对照组中有4例微量表达Survivin，12例均微量表达Survivin-2B；56例膀胱癌标本全部表达survivin和Survivin-2B。Survivin的表达量与膀胱癌的病理分级和浸润深

2、度呈正相关（0.5发展中可能起不同作用，Survivin-2B在膀胱肿瘤的进展中可能具有负性调节作用，并可能更早预示肿瘤的发生。提示survivin及其异构体Survivin-2B很可能成为膀胱癌治疗的良好靶点。【关键词】膀胱癌Survivin；Survivin-2B异构体实时定量RT-PCRExpressionandclinicalsignificanceonsurvivinanditsisomersurvivin-2Binbladdercancer［Abstract］ObjectiveToinvestigatetheexpressionofsu

3、rvivinmRNAanditsisomersurvivin-2BmRNAinbladdercanceranddiscussitspotentialclinicalsignificance.MethodsReal-timequantitiveRT-PCRwasusedtodetecttheexpressionofsurvivinmRNA，survivin-2BmRNAin56casesofbladdermalignanttumortissuesand12casesofbladdernonmalignanttumortissues.ResultsMi

4、crocrystallineexpressionsofsurvivinandsurvivin-2Bweredetectedin4and12nonmalignanttumortissuesrespectively.Survivinandsurvivin-2Bexpressionsweredetectedinallmalignanttumortissues.Expressionofsurvivinwascorrelatedwellwithpathologicalgradeandinfiltrationdepth（0.5［Keywords］bladder

5、cancer；survivin；survivin-2B;isomer;real-timequantitiveRT-PCRSurvivin是凋亡抑制蛋白家族IAPs（inhibitorofapoptosisproteins）中结构最简单，抗凋亡作用最强的蛋白分子，含有四个外显子和三个内含子，只含有一个杆状病毒IAP重复序列（baculoviralIAPrepeats，BIRs），BIR结构主要起抗凋亡作用。Mahotka等在1999年鉴定出Survivin的一种异构体Survivin-2B，Survivin-2B添加了被隐含外显子2B编码的23个氨基

6、酸，该外显子插入到Survivin的BIR区（外显子2和3之间）改变其三级结构及抗凋亡活性，在转染实验中发现Survivin-2B有明显降低抗凋亡的特性，并具有细胞毒性［1，2］。本研究通过运用实时定量PCR法检测膀胱癌组织中SurvivinmRNA及Survivin-2B4mRNA的表达，并做定量分析，探讨它们在膀胱肿瘤发生、发展中的作用及临床意义。1对象与方法1.1研究对象选取2006年6月～2007年9月手术切除的原发性膀胱癌患者新鲜标本56例，男36例，女20例，年龄46～82岁，平均64岁。取同期膀胱非恶性肿瘤患者的膀胱病变组织标本12例

7、（慢性膀胱炎6例，腺性膀胱炎3例，内翻乳头状瘤3例）作为对照。标本均具有完整的病理资料。按WHO病理分级标准：Ⅰ级17例，Ⅱ级28例，Ⅲ级11例；浸润深度：未侵及肌层39例，侵及肌层17例。1.2RNA提取及逆转录反应将标本剪至0.2cm3左右大小，无菌生理盐水冲洗3次，吹打成匀浆，加Trizol试剂1ml，一步法抽提RNA。逆转录反应共40μl体系，包括六随机引物2μl（上海生工公司），RNA4μl，DEPC水9μl（BBI公司），5×Buffer8μl，MMLV1.5μl，Rnasin0.5μl（Promega公司），dNTP0.5μl，H2O

8、14.5μl，37℃1h，95℃5min，最后冷却至4℃，保存于-20℃备用。1.3实时定量RT-PCR反应以abl为内参