“焦三仙”炒焦增强消食导滞的“焦香气味”物质及其协同增效作用机理研究

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1、国内图书分类号：R283.1密级：公开国际图书分类号：615.1西南交通大学研究生学位论文“焦三仙”炒焦增强消食导滞的“焦香气味”物质及其协同增效作用机理研究年级二○一五级姓名徐瑶申请学位级别硕士专业药学指导教师万军副教授二零一八年五月ClassifiedIndex:R283.1U.D.C:615.1SouthwestJiaotongUniversityMasterDegreeThesisSTUDYONTHE“COKEAROMA”MATERIALBASISTHATPROMOTEDIGESTIONANDTHESYNER

2、GISTICMECHANISMOF“JIAOSANXIAN”AFTERCHARREDGrade:2015Candidate:XuYaoAcademicDegreeAppliedfor:MasterofMedicineSpeciality:PharmacySupervisor:WanJunMay,2018西南交通大学硕士研究生学位论文第I页摘要目的：“三仙”是山楂、麦芽、六神曲三味药的习称，其焦品称为“焦三仙”。本研究拟探究“焦三仙”炒焦前后指标化学成分变化，以及产生的“焦香气味”物质基础，找到共性物质，阐明“焦三仙”

3、炒焦后消食导滞作用增强的物质基础；通过药理实验探究“焦三仙”消食导滞作用增强的机制，阐明炒焦类中药“焦香醒脾”的作用机理。方法：1．参照《中国药典》2015版，采用在线非接触式温控方式在中火条件下制备出相应“焦三仙”。“焦三仙”炮制前后原有与消化相关的指标性成分含量检测：采用滴定法测定有机酸含量；采用DNS法测定淀粉酶活力；采用Folin酚法测定蛋白酶活力。从原有的功效成分着手，探究炮制原理。焦香气味物质基础研究：采用HPLC测定美拉德（Maillard）反应标志物5-羟甲基糠醛（5-HMF）含量，采用顶空固相微萃取

4、(HS-SPME)结合气质联用(GC-MS)的方法分析“焦三仙”炮制前后气味变化，筛选出焦香气味成分共性成分，找到“焦香醒脾”的共性物质基础，为下一步研究奠定基础。2．建立KM小鼠和SD大鼠食积型消化不良模型，分为空白组、模型组、阳性组、生品组、焦品组、焦香气味组、焦品+焦香气味组，自主设计气味给药仪器，动物灌胃和气味给药。期间，记录动物体重及摄食量。小鼠采用灌胃营养性半固体糊的方法，进行胃排空和肠推进实验，计算胃内残留率和肠推进率，同时进行D-木糖吸收实验，采用Elisa法测定血清D-木糖含量。收集大鼠胃液，记录胃

5、液分泌量，滴定法测定胃液酸度，并计算胃酸总流量，Mett氏毛细管法测定胃液中胃蛋白酶活力；采用Elisa法测定大鼠血清中脑肠肽MTL（胃动素）、VIP（血管活性肠肽）、CCK（胆囊收缩素）的含量；采用免疫组化法测定大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠中Ghrelin(胃促生长素)蛋白的表达。结果：1．炒焦后与消化相关的有机酸含量、淀粉酶活力及蛋白酶活力均显著降低。2．炒焦后美拉德反应标志性产物5-HMF含量显著升高。筛选出“焦三仙”焦香气味共性成分6个：3-甲基-丁醛、2-甲基-丁醛、糠醛、5-甲基-2-呋喃甲醛、2,3-二氢

6、-3,5-二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮，5-羟甲基糠醛。西南交通大学硕士研究生学位论文第II页3．药理实验结果：（1）与模型组比较，焦品组和焦品+气味组动物体重增长最明显、进食量最多、食物利用率最高，气味组大鼠体重、进食量、食物利用率也显著增长。（2）与模型组比较，气味组小鼠胃排空、肠推进显著加快（P<0.001），血清D-木糖含量显著升高（P<0.01）。与焦品组比较，焦品+气味组胃排空、肠推进显著加快（P<0.05），血清D-木糖含量显著升高（P<0.05）。（3）与模型组比较，焦品组和焦品+焦香气味组大

7、鼠胃液分泌、胃酸总流量、胃蛋白酶活力显著增加(P<0.01或P<0.001)；焦香气味组促胃液分泌功能不明显，但胃酸总流量显著升高，胃蛋白酶活力显著升高(P<0.01或P<0.001)。与焦品组比较，焦品+焦香气味组胃酸总流量、胃蛋白酶活力显著增加（P<0.001）。（4）与模型组比较，气味组大鼠血清MTL含量显著升高（P<0.01），CCK含量降低不明显，VIP含量降低不明显；与焦品组比较，焦品+气味组血清MTL含量显著升高（P<0.05），CCK含量显著降低（P<0.05），VIP含量降低不明显。（5）与模型组比

8、较，气味组大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠中的Ghrelin蛋白表达明显增多（P<0.05）。结论：1．炒焦后有机酸含量、消化酶活力均降低，推测“焦三仙”功效成分不只是有机酸、消化酶类，可能有新物质产生增强疗效。2．“焦三仙”均检测到较高含量的5-HMF，推断均发生了Maillard反应，产生了以5-HMF为代表的一系列美拉德反应的风味产物—焦香气味