白花丹参和紫花丹参生化标记分析

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1、万方数据LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOI．．20NO．1时珍同医围药2009年第20卷第1期白花丹参和紫花丹参生化标记分析韩琳娜1，李红梅2(1．山东中医药大学，山东济南250035；2．山东省科学院，山东济南250035)摘要：目的分析白花丹参和紫花丹参在蛋白水平的遗传差异。方法利用叶片过氧化物酶和种子贮藏蛋白两种生化标记对白花丹参和紫花丹参进行了分析。结果同工酶分析表明，两种丹参间过氧化物酶同工酶谱存在差异；贮藏蛋白分析表明，丹参

2、种子蛋白主要是以盐溶性蛋白为主，水溶蛋白和醇溶蛋白较少，碱溶性蛋白更少；两种丹参种子贮藏蛋白谱带之间的差异性不明显。结论二者在蛋白水平存在一定差异。关键词：紫花丹参；白花丹参；贮藏蛋白；同工酶；聚丙烯酰胺凝胶电泳法；生化标记中图分类号：R284．1文献标识码：A文章编号：1008-0805(2009)01-0211旬1BiochemicalMarkerCharacterAnalysisofWhiteFlowerDanshenandVioletFlowerDanshenHANLin．nal，LiHo

3、ng—mel‘2(1．ShandongUniversityofTraditionalChineseMedwine，Jinan250355，China；2．ShandongAcademyofSci—ences．Jinan250014，China)Abstract：ObjectiveToanalyzewhiteflowerDanshenandvioletflowerDanshenintheir2biochemicalmarkers(perodiaseandstorageprotein)．Methods

4、Twobiochemicalmakersofperodiaseandstorageproteinwereanalyzed．Result7FherewasdifferenceinperoxidasePAGE—bandingpateerns．SeedproteinsofwhiteflowerDanshenandvioletflowerdanshenwererespectivelyextrac-tedusingdistilledH2O，2．5％NaCI，0．2％NaOHand75％alcoh01．Bas

5、edonacrylamidegelelectrophoresis，mostofstorageproteinsweresalt—soluble．water—solubleandaclohol—solubleproteinswasless．Therewasalittlealkali—solubleprotein．ConclusionThereisdifferenceinstorgeproteinbetweenwhiteflowerDanshenandvioletflowerDanshen．Keywor

6、ds：WhiteflowerDanshen；VioletflowerDanshen；Storageprotein；Isozyme；PAGE；Biochemicalmarker丹参Salviamiltiorrhiza味苦、性微寒，功能活血祛淤，安神宁心，排脓止痛⋯，临床应用范围较广。就』t形态学性状而言，可分白花、紫花两种。传统育种巾的形态学鉴定只能揭示外观差异且受环境影响较大，不能完伞揭示品种问的遗传差异。牛化标记是以基因表达产物蛋白质作为遗传标记，主要包括贮藏蛋白、同工酶和等位酶标记旧J。生化标

7、记分析是一种快速、简便、有效的遗传检测手段。作为牛化标记的同工酶、非酶形式的蛋白质，已经被广泛地应用丁遗传种质的分离、筛选、品种鉴定以及生物多样性、杂种优势的研究中p“J。本研究利用贮藏蛋白和过氧化物酶同工酶两种生化标记对白花丹参和紫花丹参进行了分析，以期了解其在蛋白质性状水平的遗传差异，为种质资源的收集和二者药效成分上的比较提供理论依据。1材料与方法1．1材料供试材料白花丹参和紫花丹参均由山东中医药大学药圃提供。1．2方法1．2．1过氧化物酶提取称取lg鲜材料，冰浴研磨，加入1ml稀释4倍的浓缩

8、胶缓冲液(pH=6．7)，冰浴超声提取15min，8000r／min，o气：离心20min。上清液加入等体积40％蔗糖溶液混匀，作为供试溶液，可在4℃冰箱内储存备用。1．2．2蛋白质提取蛋白质提取分为分步提取和一次性提取两种。分步提取主要研究丹参种子中各类蛋白质的组成及比例；一次性提取主要比较在不同提取液的情况下，蛋白质谱带的带型。分步提取方法：取丹参种子粉碎后称取0．1g，加入600“l水，在60℃水浴中提取40min，10000r／min离心5min，取上清液备用，再用水按同样