小球藻多糖的分离纯化和组成分析

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1、第!"卷第#期大连水产学院学报$%&’!"(%’#!))*年+月,-./(01-230140(24567/475.(4$7/54895:;’!))*·研究简报·文章编号：")))<++=>（!))*）)#<)!+?<)#小球藻多糖的分离纯化和组成分析"!!#李亚清，@杨海波，@刘@艳，@王心满（"’大连理工大学精细化工国家重点实验室，辽宁大连""*)"!；!’大连大学环境与化学工程学院，辽宁大连""**!!；#’辽宁省朝阳师范高等专科学校生物化学工艺系，辽宁朝阳"!!)))）@摘要：采用冻结<融化方法，用冷水提取海水小球藻!"#$%&##’A;’多糖，多糖经除蛋白、乙醇

2、分级沉淀、柱层析等一系列步骤处理后，得到组分均一的小球藻多糖（简称BC5D<"）。将BC5D<"完全酸水解，用高效阴离子液相色谱对其溶液进行分析，结果表明：组成多糖BC5D<"的单糖有3<岩藻糖、3<鼠李糖、3

3、细胞、增强机体免疫力、抵抗外来疾病的入侵、促进人体受伤组织修复等作用，还能防止胃溃疡、高血压和心脑血管疾病的发生，是目前国内外研究开发的热点。多糖是小球藻提取液中众多活性成分之一，目［"

4、!<氨基葡萄糖均由美国5QROJ公司生产，其它试剂或溶剂均为0B5级，由比利时0PN%A公司生产。!#$"方法"G!G"@分离纯化@"）将生长至平衡期的小球藻液离心（#=))NSOQT）=OQT，获得新鲜的小球藻藻泥；!）向藻泥中加入=倍体积的去离子水，置于冰箱（

5、数为+=V），所得的沉淀物即为小球藻粗多糖；*）将粗多糖溶于水，再用体积分数分别为")V、#)V、=)V的乙醇进行分级沉淀，最终得到#个级别的多糖，记为BC50、BC5D和BC5B（BC5为英文BI&%N:&&J;%&WAJPPIJNQK:的缩写），其中BC5D的含量较大。取一定量的BC5D加入适量的蒸馏水至完全溶解，用5:;IJK:LM<=)（柱型："G=POX>=G)PO）柱层析，进一步纯化。上样后用)G)!O%&S1的(JB&溶液洗脱，流速为)G#O1SOQT，每管收集#O1，［#］然后用蒽酮<硫酸法跟踪检测。收集含糖部分的洗脱液，经蒸馏水透析、浓缩，用体积分数为

6、@收稿日期：!))?Y"!Y!=@基金项目：辽宁省博士科研启动基金资助项目（))")=+）@作者简介：李亚清（"+*?<），女，副教授。7

7、%）6/7.法。检测仪器为：6/7.岛津高效液相色谱仪（7.2$&89:/）；;89<=0%5$5示差折光检测仪；色谱柱为90>?5&&不锈钢柱；记录仪为岛津.2=,8。多糖./012$样品的浓度为%@(7，进样量为%&!7，流速为$)7()*+，流动相为$3&@(7的AB.C。$3%3D4紫外光谱和红外光谱的测定4用>1’法压片，然后用AE.F7<92",&型红外光谱仪测定；用G:2H""1型紫外可见分光光度计测定多糖./012$饱和溶液的吸光值，空白溶液为蒸馏水。［"］$3%354多糖的组成测定4$）蛋白质和淀粉的检测4用茚三酮法检测