不同云芝菌株及提取工艺所得结合蛋白多糖的分析比较

不同云芝菌株及提取工艺所得结合蛋白多糖的分析比较

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1、中国医药工业杂志=89Q[Qv2w49T72q;T4STYQwV8YT7[(%%%-r>*$(+u),)u"!!!!!!!!"!!"药!物!分!析!与!质!量!!"文章编号#$%%$&’())*(%%%+$(&%),)&%,不同云芝菌株及提取工艺所得结合蛋白多糖的分析比较杨晓彤-糜可-冯慧琴-吴予尘-杨庆尧.*上海师范大学微生物与免疫学研究所-上海(%%(/,+摘要#分别用酚&硫酸法012345&62789法和高效液相凝胶渗透色谱法*:;<;=+测定云芝菌丝体提取物云芝糖肽*>+中糖和蛋白质的含量及分子量?来自’株菌株的提取

2、物其多糖含量为,$@$AB,C@,A*DE%@%)+F蛋白质含量为(/@$AB/G@GA*DH%@%)+-分子量为/,IJBG’IJ?云芝菌丝体经碱提得到的提取物>&K-多糖含量和分子量分别为$$@%A和$,IJ-均低于其进一步的醇沉物>&KL*/)@’A和/’IJ+-但两者蛋白质含量为/G@,A和/’@)A-无显著差异?菌丝体水提物>&ML经纯化后得>&M=-其多糖含量和分子量分别上升到C$@,A和)/IJ?关键词#云芝F云芝糖肽F菌株F提取F高效液相凝胶色谱法中图分类号#NG)C@C(文献标识码#L云芝糖肽*Z275[TYY

3、T42ZQZV8]Q-;^;->+是从>仪器与试药药用真菌云芝*_‘ab‘cdefgaebh‘c‘a+深层培养菌丝体>@>样品中提取的结合蛋白多糖-具有抑制肿瘤0调节免疫0分离自不同产地的云芝菌株’株*本所提供+?降低放0化疗毒副反应等多种药理作用i$-(j各菌株经深层培养得到的菌丝体-分别用热水-并有抗艾滋病毒活性i/j提取0乙醇沉淀得到结合蛋白多糖提取物-编号为?$OO’年>已被国家卫生部批准为国家k类新药?=Nm0辽&$0辽&(0吉&$0吉&(0吉&/0吉&,和吉&)?;^K*K4Q[V89+是日本吴羽化学工业株式会社菌

4、株=Nm菌丝体用稀碱提取-超滤除去分子的云芝提取产品?;^K的生产菌株为=l&$%$菌量小于$%IJ的物质后得到>&K->&K再经醇沉提株-采用碱提超滤工艺生产i,-)j取得到>&KL?F>的生产菌株为云芝=Nm&$-用水提醇沉法提取?由于两者在生产菌菌株=Nm菌丝体水提醇沉后得到的样品-编株和提取方法上不同-导致产品药用成分和药效亦号为>&MLF>&ML再用超滤法去除分子量小于$%不尽相同#>含鼠李糖和阿拉伯糖-能增进食欲-缓IJ的杂质0冻干得>&MnF>&Mn进一步经乙醇0乙解疼痛F;^K含岩藻糖-有消炎的作用iGj醚0丙酮

5、洗涤纯化-得>&M=??研究云芝结合蛋白多糖的生产菌株和提取方法-对改进生产>@o试剂工艺0提高药效有重要意义?无水葡萄糖0浓硫酸均为国产分析纯F牛血清白多糖的理化性质0生理活性与分子量有很大关蛋白*n^L-上海丽珠东风生物技术有限公司+F标准系iCj分子量JQUV4T9*^8WST公司+F孔径%@,)pS的?过去测量多糖分子量常用超速离心0电泳等方法-既繁琐-误差又大?高效液相凝胶渗透色谱法M7V4Tq4QQ&l=离心过滤管*l8778Z24Q公司+?*:;<;=+测定多糖分子量-具有快速0分辨率高和>@r仪器重现性好的优点-

6、在国内外已得到广泛应用iCBOj?本高效液相色谱仪为美国nQYIST9公司的<27]实验采用此法对云芝不同菌株水提醇沉物以及用不^5[VQS-附$()型泵-<87[29$/(型示差检测器-同提取方法和纯化途径所得提取物的分子量进行分P^K<,%%%^s柱*C@Gt/%%SS-加C@GtC)SS析-并对其多糖和蛋白质含量作比较测定-以筛选优保护柱+FMm&C),型分光光度计*上海第三分析仪良菌株-优化提取工艺?器厂+F超滤系统*美国^59]Q4公司-超滤膜截留分子量为$%IJ+?收稿日期#$OOO&%O&(’作者简介#杨晓彤*$O

7、GC+-男-博士研究生?o方法和结果PQ7#%($&G,/((O/,o@>糖含量测定R&ST87#UV5T9WX($Y9@Y2S酚&硫酸法i$%j-以葡萄糖为标准品?r48Mr中国医药工业杂志Ks+,+E?*U399902YN.3Q!"!蛋白质含量测定Y(iD5Y(iR0其多糖含量分别为ZZ"c]5-../#$%&’()$*+,法0以牛血清白蛋白为标准品1M7"4]Nfg9"9.Q1Y(iK多糖含量为6."8]0与Y(-.3/!"2分子量测定iR比0无显著差异N表Z08Q1先将标准分子

8、量4.35.675895.3:;的;<=(比较三者的蛋白质含量0亦无明显差异N表Z0>&?,分别用9"93@$*A#B?CDE溶液配成浓度为4Q1.9@FA@*的溶液0经9"84G@离心过滤管离心过表2Yjk5Yjkl5Yjml5Yjmn5Yjmo的多糖及蛋白滤

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