人重组骨形态发生蛋白2和13对软骨细胞蛋白多糖基因表达调控的研究

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1、万方数据·76·生堡匝星痘堂苤查2QQ2生2旦箜13鲞筮!塑堡蝤!』曼h!坚堡塾!!,F!b婴!g2凶2,y丑:13,盟!:2人重组骨形态发生蛋白2和13对软骨细胞蛋白多糖基因表达调控的研究孙正明刘淼张银刚霍玉萍【摘要】目的研究重组人骨形态发生蛋白(rhBMP)2和rhBMPl3对软骨细胞蛋白多糖基因表达的调控作用。方法采用1,9二甲基亚甲蓝比色法检测高(625ng/m1)、中(125ng/m1)和低(25ng/m1)浓度组的rhBMP2和rhBMPl3对软骨细胞硫化糖胺聚糖生成的影响;采用反转录聚合酶链反应测定3种不同浓度组的rhBMP2和rhBMPl3对软骨细胞聚集蛋白聚糖mRNA

2、表达的影响;用HoechstDye法检测不同浓度组的rhBMP2和rhBMPl3对软骨细胞的增殖作用。结果与对照相比,不同浓度的rhBMP2和rhBMPl3促进软骨聚集蛋白聚糖mRNA的表达差异均有统计学意义(P<0.05);在DNA的检测中,与对照相比,不同浓度组的rhBMP2和rhBMPl3促进软骨细胞增殖差异均无统计学意义。结论rhBMP2和rhBMPl3均能增加软骨细胞聚集蛋白聚糖的表达,rhBMP2比rhBMPl3对软骨细胞基因表达有更大的正向调控作用。但rhBMP2和rhBMPl3对软骨细胞增殖差异无统计学意义。【关键词】骨形态发生蛋白类;软骨细胞蛋白多糖;基因表达;椎间盘

3、退变Theeffectsofrecombinanthumanbonemorphogeneficprotein2andproteinl3ontheexpressionofproteoglycangeneinchondrocytesSUNZheng—ruing*,LIUMiao,zHANGYin-gang,HUOYu-ping.*DepartmentofOrthopaedicsoftheFirstAffiliatedHospital,MedicalCollegeofXi7anJiaotongUniversity,工i锄710061.ChinaCorrespondingauthor:ZHAN

4、GYin—gang,Email:emailzyingang@mail.巧tu.edu.cn【Abstract】objectiveByexploringtheeffectsofrecombinanthumanbonemorphogeneticprotein(rhBMP)2andrhBMPl3onchondrocytesproteoglycanproductionandphenotypeexpressiontoestablishthetheoriticalmechanismsforthetreatmentofdiscdegenerationwithchondrocytestransplan

5、tationplusBMPs.MethodsThedose——dependenteffectsofrhBMP2andrhBMPl3onPGproteinsynthesisandgeneexpressionweredetectedunderdifferentconcentrations(0,25,125,and625ng/m1).Thesulfated—glycosamin091ycan(s—GAG)inthecuhuremediaandthepericellularmatrixwasmeasuredwitha1.9一dimethyl—methyleneblue(DMMB)colorim

6、etricassay.Reversetranscriptasepolymerasechainreaction(RT—PCR)wasperformedresp—ectivelytoquantifytherelativeabundanceofaggrecanmRNA.CellproliferationwasexaminedbyHoechstDyeassay.ResultsAllrhBMP2andrhBMPl3indifferentconcentrationscouldsignificantlyincreases-GAGsy—nthesisandgeneexpressioninchondro

7、cytes(P

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