灵芝孢子多糖胶囊增强免疫力的研究(二)

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1、灵芝孢子多糖胶囊增强免疫力的研究(二)作者:冯鹏沈建刘诚吴东孙予罕【摘要】  目的观察中科特泰胶囊对小鼠免疫力的影响。方法将120只健康雌性小鼠分为3个实验组,每组分高、中、低和对照4个剂量组,连续灌胃给药30d后,分别进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、淋巴细胞转化、NK细胞活性试验以及小鼠抗体生成实验,测定相关的免疫学指标。结果高、中剂量组对小鼠巨噬细胞吞噬能力、淋巴细胞转化、NK细胞活性以及抗体生产均有明显的提高,与对照组比较有显著性差异。结论中科特泰胶囊对小鼠的免疫力具有一定的增强作用。【关键词】特泰胶囊淋巴细胞转化NK

2、细胞抗体生成Abstract:ObjectiveToobservetheimmunemodulationeffectofZhongkeTetaiCapsuleonSDratsweredividedintogroups,eachgroupwasadministeredwithhigh,medium,lowandcontroldoserespectively.Aftergastricinjectionfor0days,testofratsceliacmacrophagephagocytosingchickenredbloodcell,

3、lymphocytetransformationtest,NKcellactivitytest,ratsantibodyformingtestwerecarriedtotesttherelativeimmune,mediumgroupenhancedratsphagocytingability,lymphocytetransformationability,NKcellactivityandantibodyformingabilitywhichshowedobviousdifferencefrommodelTetaicapsule

4、canimproveratsimmunity.Keywords:TetaiCapsule;Lymphocytetransformation;NKcell;Antibodyforming  自20世纪70年代日本学者率先报道了灵芝具有抗肿瘤作用后,国内学者在研究灵芝“扶正固本”的中医药理过程中,发现灵芝多糖具有多种免疫增强作用,并提出灵芝多糖的抗肿瘤作用也是通过提高动物的免疫功能介导的。中科特泰胶囊主要成分为灵芝多糖和多肽,在前期免疫学实验中,其对小鼠炭粒廓清能力,血红素生成能力等方面都有一定的提高,提示对小鼠免疫力有一定的改善作用

5、。本实验拟考察特泰胶囊对淋巴细胞转化、NK细胞活性以及小鼠抗体生成方面的影响。1材料与方法材料样品中科牌特泰胶囊由南京中科药业有限公司提供,为瓶装胶囊,内容物为褐色粉末,人体推荐量为内容物净重每人800mg/d。置于密闭、阴凉干燥处保存,供试验用。试剂SRBC,RPMI1640,ConA,MTT,异丙醇,SA缓冲液,YAC-1细胞,LDH基质液。动物选用上海西普尔-必凯实验动物有限公司繁殖的~F1健康雌性小鼠120只,合格证号:SCXKXX-0002,随机分为3个实验组,分别进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、淋巴细胞转化、NK

6、细胞活性试验以及小鼠抗体生成实验。剂量每个实验组分别分为6mg/kg、13mg/kg、400mg/kg和空白对照组。经口每日一次给于小鼠相应剂量的受试物,空白组给于等剂量的生理盐水。连续给药30d后测量各项增强免疫力功能指标。仪器T1000型电子动物称、722型分光光度计、超净工作台、酶标仪、二氧化碳培养箱。方法小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验各剂量组连续灌胃30d,制备20%的鸡红细胞悬液,每只鼠腹腔注射1ml,间隔30min,颈椎脱臼处死小鼠,正中剪开腹壁皮肤,经腹腔注入生理盐水2ml,转动鼠板1min,然后吸出腹腔洗液1ml

7、,平均滴到2片载玻片上,移置37℃温箱孵育30min,然后于生理盐水中漂洗,晾干,以1∶1丙酮甲醛溶液固定,4%Giemsa-磷酸缓冲液染色min,再用蒸馏水漂洗晾干,光镜下观察。ConA诱导小鼠淋巴细胞转化实验[1]各剂量组连续灌胃30d,颈椎脱臼处死小鼠,无菌取脾,研磨制成单个细胞悬液,调整细胞浓度为3×106个/ml悬浮于1640培养液中,种植于24孔培养板,加7μlConA液作为诱导组,不加为对照组。5%CO237℃孵箱培养7h后,MTT法测定淋巴细胞。NK细胞活性测定实验[2]各剂量组连续灌胃30d,颈椎脱臼处死小鼠,无

8、菌取脾,研磨制成单个细胞悬液,离心,弃上清,将细胞加入灭菌水20s,裂解红细胞后加入的2倍Hank's液及mlHank's液,离心后悬浮于1640培养液中,1%冰醋酸稀释后计数,调整细胞浓度2×107个/ml。实验前2h将靶细胞传代培养,调整细胞浓

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