鱿鱼皮胶原蛋白的提取及在化妆品中的应用

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第27卷第8期科学V01．27No．82oo8年8月FISHEIllESSCIENCEAug．2oo8鱿鱼皮胶原蛋白的提取及在化妆品中的应用刘克海，秦玉青，徐海波，刘承初(1．上海水产大学食品学院，上海200090；2．上海市标准化研究院，上海200031)关键词：鱿鱼皮；胶原蛋白；提取；化妆品中图分类号：TS254．9文献标识码：B文章编号：1003—1111(2008)08-0411-03胶原蛋白对皮肤具修复和滋养作用，又有良好白酶溶液浸提72h(pH2．0，4℃)，过滤，6000r／组织相容性¨】，成为美容界流行和推崇的化妆

2、品原min离心15min，取上清液即得胶原蛋白粗提液。料。鱿鱼皮中胶原蛋白含量较高，约占质量的操作如下：37％[2]，采用适宜方法提取胶原蛋白，并应用到化除杂后的鱿鱼皮1：20ml胃蛋白酶促溶72妆品中，开发鱿鱼皮胶原蛋白美容制剂，具有良好h(pH2．0，4c【=)离心(6000r／min，15min)产业化前景。取上清液即得胶原蛋白粗提液。于粗提液中加入氯化钠使浓度达到2．5mol／1材料与方法L，盐析48h后，6000r／min离心15min，取沉淀用1．1材料0．5mol／L醋酸溶解，加入透析袋，透析外液采用鱿鱼皮由浙江远洋渔业总公司提供，一18℃冷0．5mol／L醋酸，

3、重复盐析一透析3次，冷冻干燥即冻保存；胃蛋白酶购自中国医药集团上海化学试剂得胶原蛋白。公司，其活力为4600U／g；凡士林、硬脂酸、十六醇、胶原蛋白粗提液加入氯化钠溶液至浓度为橄榄油、三乙醇胺、液体石蜡、白油、司盘6O、丙二醇2．5mol／L(48h)离心(6000r／min，15min)等试剂购自上海凌峰化学试剂有限公司。取沉淀用醋酸溶解透析(4c【=，72h)冷冻干1．2鱿鱼皮胶原蛋白的提取与纯化燥鱿鱼皮胶原蛋白。鱿鱼皮质量(干)的75．6％是蛋白质J，其中1．3鱿鱼皮胶原蛋白中氨基酸含量的测定大部分为酸溶性蛋白和热水可溶性蛋白，而胶原蛋委托上海生化所对鱿鱼皮胶原蛋白冷冻干

4、燥白主要存在于酸溶性和热水可溶性成分中，不溶于品的氨基酸组成进行测定。样品前处理条件为6水和稀碱溶液，为碱不溶性蛋白。去除水溶性蛋白mol／LHC1，11O℃水解18h，所用仪器为835—50和盐溶性蛋白(或碱溶性蛋白)，并用胃蛋白酶提型氨基酸分析仪(日立)，洗脱液为1—4号柠檬酸取，盐析、透析进行纯化，冷冻干燥即得胶原蛋缓冲液，显色剂为茚三酮溶液，样品质量浓度为白[引。0．15—0．2mg／ml，上样量为0．05ml。1．2．1去除非胶原蛋白杂蛋白1．4鱿鱼皮胶原蛋白的吸湿性和保湿性测定刮考虑到碱提取时常使胶原蛋白变性，故试验采样品前处理：室温下，将冷冻干燥后的样品用用水和氯

5、化钠溶液去杂蛋白。经考察，确定去除盐五氧化二磷真空干燥12h。溶性蛋白时，氯化钠溶液浓度为5％、pH中性、浸渍吸湿性测定：精确称取经前处理干燥后的样品24h。操作如下：约0．5g于称量瓶中，将称量瓶置于放有饱和碳酸鱿鱼皮组织捣碎5：1(Vim)水静置3O钠溶液(RH=43％)中48h后，称量样品前质量rain(2次)氯化钠溶液浸泡离心(6000r／(m。)和放置后质量(m)，按下式计算吸湿率：rain，15min)重复盐析、离心3次取沉淀。1．2．2胶原蛋白提取、纯化J吸湿率／％．’：×100％mo按上述方法得到除杂后的鱿鱼皮，用l％胃蛋保湿性测定：室温下，精确称取经前处理干燥

6、收稿日期：2007一lO一15；修回日期：2007—12—24．基金项目：国家“十一五”科技支撑计划(2006BAD05A18)；上海市属高校高水平特色项目资助(6870309)；上海市重点学科建设项目资助(T1102)．作者简介：刘克海(1977一)，男，讲师，硕士，研究方向：海洋药物的研究与开发；E—mail：khliu@shou．edu．cn．通讯作者：刘承初(1965一)，女，教授，博士，研究方向：海洋生物资源利用、营养与食品安全；E—mail：eeliu@shfu．edu．cn．维普资讯http://www.cqvip.com412水产科学第27卷后的样品约0．5g于

7、称量瓶中，加人质量为样品量酸总量为76．76g／100g，其氨基酸组成见表2。10％的水。称量瓶放置在预先装有饱和碳酸钠溶表2鱿鱼皮胶原蛋白的氨基酸组成g／100g液(RH=43％)的干燥器48h后，称量样品放置后水分量Hn和添加水分量。根据下式计算水分保湿率：保湿率／％=Hn×100％1．5鱿鱼皮胶原蛋白营养保湿乳的制备目前胶原蛋白主要有外用、口服、注射三种应用方法。由于胶原蛋白的螺旋结构，口服胶原蛋白生物利用度低，注射美容胶原的成本又较高，而动物试验表明，含胶原蛋白的膏体涂抹于皮肤能有效