蜂胶液中总黄酮含量测定方法的改进

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1、万方数据2009年第8期蜜蜂杂志(月干q)JouRNALoFBEE(Monthly)蜂皎液中总黄酮含量测定方法的改进林德祥·，何腾飞-。王晓平z。邵飞z，刘晓倩：，王梅z(1．南京老山药业股份有限公司，江苏南京211800；2．江苏省蜂业工程技术研究中心，江苏南京211800)摘要：研究改进后配置的芦丁对照品溶液对实验结果的影响。使用紫外一可见光分光光度法。分别以两种方法配制的对照品溶液对同一批号蜂胶液进行检测。得出20组数据，并进行假设检验，两种方法检测结果无显著性差异。说明改进后的标准品溶液能完全适用于蜂胶液总

2、黄酮的测定。关键词：蜂胶液；总黄酮；芦丁对照品中图分类号：S896．6文献标识码：A文章编号：1003—9139(2008)08一0014一02引言总黄酮作为蜂胶类保健品的功效成分，是蜂胶液中间体和成品的重要指标，对它的有效控制可直接反映出产品质量。根据试验者的发现，总黄酮的测定用的芦丁对照品溶液川(精密称取芦丁对照品适量，约含芦丁200mg，置250mL容量瓶中，加甲醇175mL，置水浴上微热溶解，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取25mL，置100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。摇匀，即得)在一段时间内有析出

3、现象。摇匀后即出现浑浊，因此只能即配即用，在一定程度上造成对照品的浪费和检测时间的延误。对此我们对芦丁对照品溶液的制备方法进行了合理的改进，得出多组数据，进行统计分析，证明改进后的方法能更好地适用于样品检测。1仪器与试剂1．1仪器6010型紫外一可见光分光光度计(惠普上海分析仪器厂)；cKcRll2型可控硅控温水浴锅(南通沪通实验仪器厂)；AE一240型电子天平(梅特勒托利多)。1．2试剂水为纯化水，甲醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯。芦丁对照品(中国药品生物制品检验所)1．3样品蜂胶液(批号：070514

4、)南京老山药业股份有限公司生产。2方法2．1两种对照品溶液的制备方法改进前(方法一)：精密称取芦丁对照品适量(约含芦丁200mg，置250mL容量瓶中。加甲醇175mL，置水浴上微热溶解．放冷．加甲醇稀释至刻度，摇匀。收稿日期：200日一0汕3修回日期：2009-．07-13精密量取25mL，置100mL容鼍瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。(每毫升含无水芦丁0．2m力。改进后(方法二)：精密称取芦丁对照品适量(约含芦丁40mg，置200mL容量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热溶解，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得

5、。每毫升含无水芦丁0．2mg。2．2对照品标准曲线的制备与测定精密量取对照品溶液0．0、1．0、2．0、3．O、4．0、5．0mL，分别置于50mL容量瓶中，各加水至5mL，加5％亚硝酸钠溶液lmL，混匀，放置6min，加10％硝酸铝溶液lmL，混匀，放置6min，加氢氧化钠试液lOmL，再加水至刻度，混匀。立即用紫外分光光度法计在510nm的波长处测定吸收度。以吸收度为横坐标。浓度或毫克数为纵坐标，计算同归方程。2．3样品的制备与测定精密量取蜂胶液lmL，置于50mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。再精密世取l

6、mL．置于50mL容量瓶中，照标准曲线绘制项下的方法，自“加水至5mL，加5％亚硝酸钠溶液1mL，混匀⋯”起依法测定吸光度。3结果与分析采用两种不同方法对芦丁对照品溶液进行配制，分别对同一批蜂胶液按标准操作规程规定的方法进行多次试验。根据其结果，对其进行方差分析，判断两种配制方法在检验结果上有无显著性差异。3．1结果样品检验结果见表1表1样品检验结果单位：mg／mL检验日期检銮蘑藁A．检盔蘑藁A：“广y)z“广y)z注1：方法一检验结果是使用改进前的对照品配制方法。注2：方法二检验结果是使用改进后的对照品配制方法。

7、14万方数据15翟蟹蜂杂志(月刊)JouRNALoFBEE(Monthly)No．82009Aug．3．2结果评判闻在一个因子两个水平A．和A：下(即选用两种不同配制方法的对照品)，分别得到10组检验结果，假设其均值相等，取显著性水平a=0．05，计算统计量F，判断结果有无显著性差异。如F<，㈨。)(．^。，：)时则接受假设，两种配制方法说所得的结果无显著性差异，说明改进后的标准品溶液能完全适用于蜂胶液总黄酮的测定；若，>FfI-。)∽。‘)时则拒绝假设。两种结果有显著性差异．说明改进后的标准品不适用于蜂胶液总黄酮

8、的测定。3．4统计分析通过，检验，经计算肛0．15。查表得‰(1，18)：4．41，得F