蜂胶制成品中总黄酮含量的测定

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1、第巧卷第1期安徽机电学院学报Vol.15No.12000年3月JournalofAnhwlwtituteofMechanicalandElectricalEngineeringMar.2000文章编号:1007-5240(2000)01-0067-05蜂胶制成品中总黄酮含量的测定周多刚‘，韩兆娜2(1.江苏亚邦集团，江苏常州213163;2.北京路德保健食品有限公司.安徽芜湖241000)摘要:用70%乙醇作萃取刘，用超声溶解蜂胶中的黄酮类化合物。研究萃取剂、萃取温度、时间对萃取率的影响.再与牙.生成络合物，以芦丁为标准样。采用分光光度法测定蜂胶制成

2、品中的总黄酬含量，关键词:蜂胶;总黄酮;分光光度法巾图分窦号0653文献标识码:A蜂胶及其制成品是近年来日本、欧美等国方兴未艾的保健食品，具有免疫调节、降血糖、降血脂等功效，被视为“新世纪全球的第二颗太阳”蜂胶的主要功能成份为总黄酮，但总黄酮的测定往往只定性(鉴定)不定量，没有统一的定量标准和方法.由于蜂胶产地、来源不同，其黄酮类化合物的种类不同，且含量差别大111，又由于蜂胶制成品的制成工艺不同，形态各异，因而样品的处理方法千差万别.我们在实践中摸索出以乙醇超声溶解提取蜂胶中的总黄酮，AP+为显色剂，芦丁为标准样，采用分光光度法测定蜂胶中总黄酮量.

3、这种方法既准确又快速，适用于工业生产.1原理自然界约有3000种黄酮类化合物，黄酮类化合物的经典概念是指基本母核为2一苯基色原酮(2一phenylchromon的的一类化合物，大部分与搪结合成贰，在紫外线照射下，产生各种颜色萤光，遇碱后颜色改变.黄酮类化合物多具有3,4,5经基、可与许多金属试剂(如铝盐、镁盐)反应，生成有色络合物.黄酮类化合物溶解性差异大，一般难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、稀碱等，因此，可用碱性条件下的乙醇作为溶解提取液.UV是鉴定黄酮类化合物的一种重要技术，大部分黄酮类化合物在甲醇中的1八厂光谱由两个主要吸收带组成，分别是出现在，I

4、D--400nm之间的带工和出现在240-280run之间的带II，不同类型的黄酮类化合物的带I.带II的峰位、峰形、强度不同.加人诊断试剂(如乙醇钠)后，引起谱带向红移约30-70nm121.本法中，利用3,5位有经基之黄酮与心+生成络合物，在可见区有最大吸收，用芦丁作标准样进行分光光度法测定.芦丁(rutin)属黄酮类化合物，在自然界分布较广，可提取出高纯度浅黄色粉末或淡黄色引状结晶，可精密称量并配制标准溶液.芦丁与其它黄酮类化合物一样，含有相同的母环和收稿日期;1999-11-03作者简介:周多刚(1963-),男，安徽合肥人，工程师，万方数据

5、·68·安徽机电学院学报2(100年~.......曰.......相似的经、酚基，可与多种金属盐类试刘如铝盐,德盐等生成络合物，这些络合物的最大吸收波长基本相同，因此，1:样品芦丁可作为标样，并可定量代表黄酮2，芦丁总量.芦丁与A3t生成的络合物在415nm处有最大吸收，蜂胶中黄酮类化合物(多种混合物)与AV十生成的络合物约在420nm,略有差别[131，可z的300砚口旧能是其它成份影响，所以用样品液作空白校正，如图1所示.圈I黄砚类化台物与A13I络合物的光谱图2仪器和试剂2.1仪器和试剂BeckmanDU530lifesciencesyste

6、m紫外分光光度计;SB2200一T超声仪(上海必能信赶夕i有限公司);25mL比色管;HR一120电子天平(日本产);乙醇，北京化工厂;AIC13-6H20(9796)，沈阳市试剂三厂;乙酸钾(8596)，北京化工厂;芦丁标准品.22试荆配制本方法所用水均为去离子水.(1)0.1moVLAIC13溶液:称取13.4g三抓化铝(AIC13-6H20)试剂，加水溶解并稀释至I(H()mL,混匀，备用;(2)1.0mol/L乙酸钾溶液:称取98.4g乙酸钾试剂，加水溶解并稀释至1000mL,混匀，备用;(3)?}'丁标准液:精密称取105℃干燥至恒重的芦丁

7、标准品。.1000g，用乙醇溶解，并定容至100nil，混匀后置棕色瓶中.吸取5.0ML,置于100ML容量瓶中，加乙醇稀释至刻度，混匀.此溶液含芦丁50.0ttg/mL.3实验部分3.I实验条件优化3.1.1放置时间取一定量的萃取液，加人一定量的AIC13溶液，室温下放置20--60min，每隔10min测定一次溶液的吸光度。所得数据列于表1.实验结果发现，室温下放130-40min即可.表1反应放皿时间的选定室沮(220),70%乙醉作样品萃取溶剂吸光度值样品号种20min一6350min50.6030._6m33m0.6316m3m70.542

8、0.:.560.57030.5900.6526710.6180.624:656208万方数据第1期周多刚等蜂