青枯劳尔氏菌在不同植物根际土中的动态变化

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1、一110一江苏农业科学2012年第40卷第1期李鹏，吴毅歆，毛自朝，等．青枯劳尔氏菌在不同植物根际土中的动态变化[J]．江苏农业科学，2012，40(1)：110—112青枯劳尔氏菌在不同植物根际土中的动态变化李鹏，吴毅歆，毛自朝，何月秋(云南农业大学农业生物多样性国家工程中心／云南农业大学农学与生物技术学院，云南昆明650201)摘要：在田间自然状态下，以青枯劳尔氏菌菌悬液直接浇灌玉米、小麦、萝卜、甘蓝、茎芥菜、白菜、蚕豆、小葱和大蒜等9种作物及曼陀罗和杜氏鼠尾草2种杂草根围，以TZC平板法定期检测根围土中青枯劳尔氏菌的菌落数。结果表明：玉米、小麦、萝

2、卜、甘蓝、茎芥菜、白菜、蚕豆、曼陀罗和杜氏鼠尾草等9种植物对青枯劳尔氏菌有一定的富集作用，其中曼陀罗和杜氏鼠尾草的富集作用最强；小葱和大蒜对青枯劳尔氏菌具有一定的拮抗作用，其根围土中菌落下降速率快于空白对照。这些结果对青枯病生态防治具有重要指导意义。关键词：青枯劳尔氏菌；根际土；根系分泌物；富集作用；病原生态中图分类号：$432．42文献标志码：A文章编号：1002—1302(2012)01一叭10一O2植物细菌性青枯病是由青枯劳尔氏杆菌(RalstoniaSO—生)、玉米(保玉13号)、小葱(普通市售种)；秋季栽种时间为lanacearum)引起的一种

3、分布很广的植物毁灭性病害，在炎2010年11月下旬，包括小麦(品种为云素42)、白菜(鲁春白热、多雨、潮湿的热带、亚热带、温带地区，甚至在南美洲及西1号)、甘蓝(中甘11号)、茎芥菜(浙桐1号)、蚕豆(保山小欧国家普遍流行，是许多重要农作物生产的主要限制因子。绿豆)、萝卜(日本甜脆萝卜)、大蒜(白皮大蒜)等7种作物。该病在中国大部分地区都有发生。由于该病原菌寄主范1．2样品的采集及作物根际土中青枯劳尔氏茵数的统计围广，可危害40多科的200余种植物，包括农作物、果树、林所有试验植物均栽种在云南农业大学后山的小块荒地上，木、花卉、药材、牧草等许多有重要经济

4、价值的作物，传播周围10km无农作物种植。待栽种的植物生长至15d后，开始速度快，至今还没有特别好的防治措施。早在18—19世纪，浇灌青枯菌YNPC一3悬液。浇灌时，先将植物茎基部的土锄科学家就已经观察到根系分泌物对邻近植株的促生长和抑制松，再施加菌液，以保证菌液都能进入土中并能与根部接触。作用，到20世纪7O—90年代，国际上关于根际微生态学的研连续施用菌液4d，每天收集每种植物3株，抖下大块和易脱落究已相当活跃，虽然不同学者对根系分泌物这一概念有不同的土壤，收集附着在根系上的土壤作为根际土壤，每株根际的解释，但根系分泌物与根际微生物间的互作关系已成土

5、单独放入灭过菌的纸袋中。同时，取同等深度的未种植作为研究热点。冯杭等对青枯病抗性不同的番茄品种根际细菌物，但浇灌过菌液的土作为对照。称量收集的根际土重，加入群体数量变化进行了研究。然而，国内外对于茄青枯劳尔45mL无菌水，在150r／min摇床上振荡20min，以混匀土壤，将氏菌在不同植物根部动态研究报道不多，特别是国内对病区其按梯度稀释一定倍数后吸取100L涂在TZC(2，3，5一Tfiphe—不同植物根际土壤携带菌体数量研究较少。本研究采用传统nyltetrazoliumchloride)平板上，每个样涂3个平板，置于30℃的平板培养法，对该菌在云南

6、省广泛分布的一些植物根部动恒温箱中培养48h。统计TZC板上典型青枯菌菌落数，计算出态进行跟踪研究，旨在为制订青枯病的防治策略提供科学每种植物单位重量根际土壤中青枯病菌的平均菌落数。菌落依据。数=[(每个处理平板上典型青枯菌平均菌落数×稀释倍数×45mE)／(土壤重量X0．1mE)。1材料与方法2结果与分析1．1供试菌株和植物供试的茄青枯劳尔氏菌株(R．solanacearum)YNPC一32．1青枯劳尔氏茵在夏季植物根围土中的数量变化(NCBI授权号为：HM992931．1)分离于罹病的广藿香植株，在开始观察的1—5d，曼陀罗和杜氏鼠尾草根际土中青经柯

7、赫氏法则验证该菌能侵染广藿香、烟草、番茄等作物，属枯劳尔氏菌的菌量呈明显上升趋势，5d之后，含量逐渐下1号生理小种生化3型。植物分夏季和秋季类型：夏季栽种降；20d之后，曼陀罗和杜氏鼠尾草根际土中较玉米、小葱、时间为2010年7月，包括曼陀罗(野生)、杜氏鼠尾草(野土样中含有较高的青枯劳尔氏菌数，分别是不种植作物土样对照的30、49倍，分别为22．66X10、36．1X10CFU／g；玉米收稿日期：2011—03—18根际土带菌量是对照的5．5倍，达3．99X10CFU／g；小葱根基金项目：国家自然科学基金(编号：30660007)；科技部国际科技合际土

8、中青枯劳尔氏菌的含量接近直线下降，17d之后在小葱作项目(编号：2009DFA3