酶法水解螺旋藻蛋白研究

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1、万方数据安徽农业科学，Jatmml0fAnhuiA萌．Sci．2008。36{31)：13485—13487责任编辑张彩丽责任校对张士敏酶法水解螺旋藻蛋白研究王辰，刘芳(长江大学生命科学学院．湖北荆州434025)摘要[目的]研究木瓜蛋白酶对螺旋藻蛋白的水解作用。[方法]采用正交试验设计分析温度、酶浓度、pH值、水解时问对水解度的影响，利用葡聚糖凝胶柱Sephadex(,-25层析测定螺旋藻多肽分子量，[结果]木瓜蛋白酶水解螺旋藻蛋白的最适宜工艺参数为：温度55℃，酶与底物比0．4％，时间3h，pH值6．0。[结论]当水解度为82．6％时，

2、2个螺旋藻多肽洗脱峰的分子量分别为2992和231Da。关键词螺旋藻蛋白；水解度；蛋白酶；多肽中图分类号Q949．2文献标识码A文章编号0517—6611(20唱)3l一13485一∞stayOntheEmynmtieHydrolysisof印i幽ProteinWANGChertetal(CollegeoflifeScienee．YangtzeUniversity，Jingzhou，Hubei434025)Abstract[Objective]7lheailIloftheresearchwastostLldythehydrolysisofp

3、apainOnspimlinaprotein．[Method]Theeffectsoftemt)emture，enzymeeoncentmte，pHvalue，time,011enzymatichydrolysis眦studiedby删”印naltiesisn．ThemoleeularweightofthepeptidewasdetermindusingsephadexG25．[Result]Theoptimumteclmologicaltxararnetersofthehydrolysisofpapsin013spimlinapmlein

4、WaS，lernpemture55℃，enzyme-substmteratio0．4％，time1h，pHvalue6．0．[Conclusion]Whenthede舭ofhydrolysisw酗82．6％，themolecularweightsoftwoelutionpeakofpeptidesWe陀2992and23lDa．K眄wordsSpirulinaprotein；Hydrolysisdegree(DH)；Proteinenzyme；Peptides螺旋藻(Spirulina)是一种低等的水生植物。属蓝藻门蓝藻纲颤藻科螺旋藻属或节

5、旋藻属Ilj。大量研究表明。螺旋藻是一种营养丰富而均衡，且有益于人体健康的藻类，其开发与利用引起了人们的广泛关注。螺旋藻植物蛋白质含量高达50％．75％，氨基酸品种齐全，8种必需氨基酸结构合理川2。对螺旋藻蛋白质进行水解有利于提高蛋白质的溶解性，提高利用率。采用酶法水解具有反应条件温和，专一性强，反应进程容易控制，无不良副反应等特点L3-，螺旋藻蛋白质酶解后形成多肽及小分子肽，能被人体快速吸收一o。笔者通过比较多种蛋白酶对螺旋藻蛋白质的水解度，确定对螺旋藻蛋白水解度最大的蛋白酶，对其酶解条件进行研究，并对水解产物作初步分析。1材料与方法1．

6、1试验材料螺旋藻干粉由鄂尔多斯市华益泰螺旋藻有限公司提供。1．2药品与试剂木瓜蛋白酶(>15．0×lOsU／g)，北京奥博星生物技术责任有限公司；胰蛋fLl酶(I>2．5×lOsU／g)，中国医药(集团)上海化学有限公司；风味蛋门酶(≥2×104U／g)，中国医药(集团)上海化学有限公司；碱性蛋白酶(≥1×104U／g)，Wolsen公司；Gly．Gly—Tyr-她标准四肽，Sigma公司；杆菌肽(Mr=l450．00Da)，Supelco公司；Ir酪氨酸(Mr=181．26Da)，中同科学院生物化学研究所；阿斯巴甜(胁=294．30Da)

7、，中国科学院生物化学研究所。碳酸氧铵，浓盐酸，茚三酮。磷酸二氧钠，磷酸氢二钠，三氯乙酸(1℃A)，氢氧化钠，硫酸酮，酒石酸钾钠，晡s试剂，SephadexG-25，蓝色葡聚糖2000。1．3螺旋藻蛋白水解度测定1．3．1标准曲线绘制一一。取螺旋藻干粉100nag，放人塑料培养瓶中，加入100ml浓度6mol／L的盐酸，拧紧瓶盖，在130℃的烘箱中水解12h后，再添加100ml浓度6mol／L的盐酸继续水解12h后冷却，过滤，滤液减J玉浓缩至0．5nll左右，加蒸馏水90IlIl，用浓度lmol／LNaOH中和至pH值为6．0，备用。取完全水

8、解液1．6—4．0ml于25111l比色管中，加pH值作者简介王辰(1965一)，男，湖北洪湖人，副教授，从事食品加工技术研究。收稿日期2008-08-06为8．0的缓冲溶液1．