rphplc法测定西洋参茎叶皂苷酸、碱降解物中20s原人参二醇的含量

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1、万方数据第32卷第2期2006年3月吉林大学学报(医学版)JournalofJilinUniversity(MedicineEdition)V01．32No．2Mar．2006353[文章编号]t671—587X(2006)02—0353—04RP-HPLC法测定西洋参茎叶皂苷酸、碱降解物中20(S)一原人参二醇的含量Determinationof20(S)-protopanaxadiolinacidandalkalinedegradationproductsforsaponinsfromleavesofPanaxqinquefoliumL

2、．byRP—HPLC李绪文1，林燕飞2，郑(1．吉林大学化学学院分析化学系，吉林长春130021；莹1，金永日卜，张寒琦12．海南亚洲制药有限公司药物研究所，海南海口570102)[摘要]目的：利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定西洋参茎叶皂苷酸、碱降解物中20(s)原人参二醇含量。方法：RP-HPLC法具体条件为：ZORBAXextendCl8柱(250mm×4．6m122，5p趣)，流动相为甲醇一木[90：10]，流速1．2mL·rain，检测波长203nm，柱温25℃。采用以上方法分别测定西洋参茎叶皂苷盐酸、醋酸和氢氧化钠降解

3、物中20(S)一原人参二醇含量。结果：20(S)一原人参二醇对照品溶液的进样量在0．2～23“g范围内有良好的线性关系，回归系数r为0．9999(n一7)；测定西洋参茎叶皂苷的盐酸、醋酸和氢氧化钠降解物中20(s)一原人参二醇舍量的准确度，以平均加样回收率表示分别为98．4％、96．7％和100．2％，RSD分别为1．24％、1．08“和0．91％；测定西洋参茎叶皂苷的盐酸、醋酸和氢氧化钠降解物中20(s)一原人参二醇含量的精密度，以重现性实验考察，其RSD分别为0．65蹦、0．79蹦和0．27蹦；经测定．醋酸、盐酸和氢氧化钠降解物中20(

4、s)一原人参二醇的含量分别为0．93％、0．88％和25．40％。结论：RP-HPLC法测定西洋参茎叶皂苷降解物中20(s)一原人参二醇的含量，方法简便快捷，精密度高、准确度高，可为20(s)一原人参二醇的制备及质量控翩提供可靠的检测方法；利用碱降解方法制备20(s)一原人参二醇的效率高于酸降解方法。[关键词]西洋参；茎叶皂苷；降解物}20(s)一原人参二醇；色谱法，高压液相[中圈分类号]TQ460．7z；Q657．7[文献标识码]A人参皂苷作为人参属植物中的主要成分具有多方面的药理活性，而一些人参二醇组皂苷的皂苷元20(S)一原人参二醇(

5、protopanaxadi01)，具有更强的药理活性，尤其在抑制肿瘤方面“。30。研究表明，20(s)原人参二醇抑制肿瘤生长作用比20(R)一原人参二醇强，在0．01g·L_1的浓度下，20(s)一原人参二醇和20(R)一原人参二醇对Morris肝癌细胞的生长抑制率分别为94％及90％、对Lewis肺癌细胞的生长抑制率分别为86％及79％、对Hel．a细胞的生长抑制率分别为63％及56％、对黑色素瘤K16的生长抑制率分别为58％及52％。可见20(s)型的活性大于20(R)型”]。由于西洋参茎叶皂苷中人参二醇组皂苷的含量高于人参三醇组皂苷o

6、]，因此可以利用西洋参茎叶皂苷为原料，采用酸、碱降解法制备具有天然构型而且活性高的20(s)一原人参二醇。目前所报道的人参皂苷降解方法有酸降解、高温高压碱降解、酶降解““，这些方法均可用来制备皂苷元，但产率低，副产物多是存在的主要问题。为考察酸、碱降解西洋参茎叶皂苷制备20(s)一原人参二醇的产率，本研究利用RP-HPLC法对西洋参茎叶皂苷酸、碱降解物中20(s)一原人参二醇的含量进行测定，并对此测定方法进行了系统适应性实验和方法学考察，最终确立了RP—HPLC法用测定20(s)一原人参二醇含量的方法。此外，通过西洋参茎叶皂苷在不同强度酸和

7、碱条件下降解物中[收稿日期]200506—23[基金项目]95国家重点科技攻关项目(96901一Ol一83)[作者简介]孝绪文(1966一)，男，吉林省长春市人。副教授，在读博士t主要从事药物化学研究及新药研制。*通讯作者(Tel：0431—5628012；E-mail；jinry@jhedu．on)万方数据吉林大学学报(医学版)第32卷第2期2006年3月20(s)原人参二醇含量的对比，可为制备20(s)一原人参二醇含量提供一定的理论依据。1材料与方法1．1仪器与试剂Agilent1100Series高效液相色谱仪。甲醇为色谱纯(天津四友

8、生物医学技术有限公司)，水为双蒸馏水，其他试剂均为分析纯(北京化工厂)。1．2供试品1．2．1原料本实验所用的原料为西洋参茎叶总皂苷，购自吉林省靖宇县西洋参集团华洋制药厂，产品中