禾谷镰刀菌 基因敲除 fgacl 致病性

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1、禾谷镰刀菌论文:小麦赤霉菌FgAC1基因敲除及功能研究【中文摘要】小麦赤霉病是一世界性真菌病害,该病由多种镰刀菌引起,禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)是引发该病的优势种之一。由于该病原菌侵染使得小麦严重减产,除侵染小麦外,它还侵染大麦、玉米、高粱等其他禾谷类作物,给人类带来了严重的经济损失。不仅如此,小麦赤霉菌产生的真菌毒素还严重危害人、畜的健康。近年来全球对禾谷镰刀菌开展了大量的研究工作,并取得了一系列重大进展。目前,对禾谷镰刀菌的研究逐步从传统的植物病理学水平上升到功能基

2、因组学水平上来,其研究热点逐渐集中在探索其致病机理和发现新的药物作用靶点。本研究中,作者采用基因敲除技术运用同源重组原理,敲除小麦赤霉菌(Fusariumgraminearum)致病相关基因FgAC1,并对其功能进行了分析。首先采用SplitMarker法构建基因敲除盒,对野生型菌株PH-1原生质体进行转化,获得大量转化子,经潮霉素初筛后再对转化子进行单孢分离,将分离得到的单孢子再进行PCR检测,然后再进行Southern杂交验证,最终获得两个缺失突变株。以该基因缺失株为研究对象,禾谷镰刀菌野生

3、型PH-1菌株为对照,通过菌落形态观察、生长速度测定、孢子形态观察、...【英文摘要】FusariumHeadBlight(FHB)diseaseiscausedmainlybyFusariumgraminearum.Thispathogencausesthelossofproductionnotonlywheat,butalsobarley,corn,sorghumandanyotherkindsofcerealplants,thuscausesseriouseconomicloss.More

4、over,themycotoxinsproducedbythisfungusendangeranimalandhuman’shealthseriously.Inrecentyears,agreatdealofstudiesaboutFusariumgraminearumwerecarriedoutandaseriesofsignificantprogresswereget.Nowadays,thefunctionalgenomicsresearcha...【关键词】禾谷镰刀菌基因敲除FgACl致

5、病性【英文关键词】FusariumgraminearumgeneknockoutFgAClpathogenesis【索购全文】联系Q1:138113721Q2:139938848【目录】小麦赤霉菌FgAC1基因敲除及功能研究中文摘要4-5ABSTRACT51绪论10-201.1小麦赤霉菌研究概述10-141.1.1小麦赤霉菌的生物学特性10-111.1.2小麦赤霉病概述11-131.1.3小麦赤霉菌的次生代谢物---真菌毒素13-141.2小麦赤霉菌FgAC1基因研究背景14-161.3小麦赤霉

6、菌的功能基因组学研究进展16-181.4本研究的目的和意义18-202FgAC1基因敲除盒的构建20-322.1实验材料20-232.1.1材料和试剂202.1.2培养基和主要试剂配方20-232.1.3仪器232.2实验方法23-292.2.1小麦赤霉菌PH-1菌株基因组DNA的提取——CTAB法23-242.2.2质粒pCB1003的制备24-252.2.3FgAC1基因敲除盒的构建—SplitMarker法25-292.3结果与分析29-312.3.1PH-1菌株基因组DNA的获得292.

7、3.2质粒pCB1003的获得29-302.3.3SplitMarker法构建FgAC1基因敲除盒30-312.4讨论31-323FgAC1基因敲除和转化子的鉴定32-423.1实验材料32-343.1.1材料和试剂323.1.2培养基和主要试剂配方32-333.1.3实验器材33-343.2实验方法34-383.2.1PH-1原生质体的制备与转化34-353.2.2敲除突变体的筛选和鉴定35-383.3结果与分析38-403.3.1原生质体的转化383.3.2筛选鉴定获得2个FgAC1缺失突变

8、体38-403.4讨论40-424FgAC1敲除突变体表型观察和致病力检测42-524.1实验材料424.1.1材料和试剂424.1.2培养基和主要试剂配方424.1.3实验器材424.2实验方法42-444.2.1菌落形态观察424.2.2菌落生长速度测定42-434.2.3分生孢子形态观察434.2.4产孢量的测定434.2.5菌株培养滤液颜色观察434.2.6玉米丝侵染实验43-444.2.7蕃茄果实侵染实验444.2.8自交实验444.2.9外源加入cAMP对菌落形态和生长的影响444.

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