DNA分子标记在中药鉴定中的应用及发展趋势分析.doc

《DNA分子标记在中药鉴定中的应用及发展趋势分析.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、DNA分子标记在中药鉴定中的应用及发展趋势分析作者：李力，徐永莉，张月云，赵成坚【摘要】目的对DNA分子遗传标记技术在中药材鉴定领域的应用作一综述。方法通过查阅20世纪90年代以来发表的文献进行归纳分析。结果DNA分子遗传标记技术具有微量、快速、特异性强、准确可靠、对样本要求较低的特点；使用较多的方法主要有RAPD、ISSR、ITS标记以及rRNA基因序列分析技术。同时，DNA分子标记技术也存在着使用局限、对实验硬件和从业人员的技术要求高、成本较高、技术复杂度高、对不同部位入药的药材仍然难以区分以及无法用于成药、复方、提取液鉴定等弱点。结论DNA分子遗传标记作为中药材鉴定的方法还有待发

2、展和完善。【关键词】DNA分子遗传标记；中药材；鉴定　　Abstract：ObjectiveThepapersummarizestheresearchesofapplicationofDNAmolecularmarkersinChinesemedicinalmateria.MethodsInductionandanalysiswereusedbyreferringtoliteraturereleasedsince1990s.ResultsDNAMarkerTechnologieshavecharacteristicsoftrace,rapid,peculiarity,accuracya

3、ndcredibility,lowerrequirementsforthesample.RandomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD),inter-simplesequencerepeat(ISSR),interialtranscribedspaoers(ITS)andrRNAgenesequencingtechnologyareoftenused.However,DNAMarkerTechnologieshavesomedisadvantagesthatemployeesarerequiredspecialskills,thecostishighandthet

4、echniqueiscomplicated,whileitisdifficulttodistinguishdifferentpartsofChinesemedicinalmateriausedmedicinallyandidentifypatentmedicine,ChinesemedicinecomplexprescriptionandtheextractofChinesemedicinalmateria.ConclusionThemethodsofChinesemedicinalmateriaidentificationbyDNAmolecularmarkersneedtodeve

5、lopandimprove.　　　　Keywords：DNAmolecularmarker；Chinesemedicinalmaterials；Identification　　　　针对我国药材种类繁多,来源复杂且品种混淆情况严重的状况,为了保证临床用药的安全及质量和疗效,广大中医药领域的专家学者多年来一直都致力于寻找更加科学的鉴定方法来解决这一难题。随着当今生命科学不断取得重大突破,9其中分子生物学技术以其准确性高、重复性好等特点尤为引人瞩目。DNA分子标记大致可分3类:首先是以电泳技术和分子杂交技术为核心的分子标记技术,其中代表技术有RFLP分子标记技术；第2类是以电泳技术和PCR技

6、术为核心的分子标记技术,实际使用较多的代表技术为:RAPD、简单序列重复间区标记技术(inter-simplesequencerepeatISSR)和AFLP(AmplifiedrestrictionfragmentPolymorphism)。第3类是以DNA序列为核心的分子标记技术,其代表性技术有ITS(interialtranscribedspaoers)测序分析技术。本文仅就最近十几年来DNA分子标记技术在中药鉴定方面的应用作一分析，并就其应用前景进行讨论和展望。　　1经典的DNA分子标记技术　　此类技术的代表是限制性片断长度多态性(RestrictionFragmentLeng

7、thPolymorphism，RFLP)。　　RFLP是最早发展的分子标记，是由Bostein首先提出，Soller和Beckman最先应用于品种鉴别和品系纯度的测定，这是最早发展的分子标记技术。其基本原理是利用限制性内切酶酶切不同个体基因组DNA后，与同位素或非同位素探针标记杂交，从而显示与探针含同源顺序的酶切片段在长度上的差异。RFLP探针的来源主要是RG克隆和cDNA克隆，其中cDNA探针保守性较强，许多同科物种cDNA探针都可以作为通用