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1、DNA分子标记在中药鉴定中的应用及发展趋势分析论文李力，徐永莉，张月云，赵成坚【摘要】目的对DNA分子遗传标记技术在中药材鉴定领域的应用作一综述。方法通过查阅20世纪90年代以来发表的文献进行归纳分析。结果DNA分子遗传标记技术具有微量、快速、特异性强、准确可靠、对样本要求较低的特点；使用较多的方法主要有RAPD、ISSR、ITS标记以及rRNA基因序列分析技术。同时，DNA分子标记技术也存在着使用局限、对实验硬件和从业人员的技术要求高、成本较高、技术复杂度高、对不同部位入药的药材仍然难以区分以及无法用于成药、复方、提取液鉴定等弱点。结论DNA分子遗传标记
2、作为中药材鉴定的方法还有待发展和完善。【关键词】DNA分子遗传标记；中药材；鉴定Abstract：ObjectiveThepapersummarizestheresearchesofapplicationofDNAmolecularmarkersinChinesemedicinalmateria.MethodsInductionandanalysisentsforthesample.RandomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD),inter-simplesequencerepeat(ISSR),interialtranscribed
3、spaoers(ITS)andrRNAgenesequencingtechnologyareoftenused.Hoedisadvantagesthatemployeesarerequiredspecialskills,thecostishighandthetechniqueisplicated,edicinalmateriausedmedicinallyandidentifypatentmedicine,ChinesemedicineplexprescriptionandtheextractofChinesemedicinalmateria.Conclu
4、sionThemethodsofChinesemedicinalmateriaidentificationbyDNAmolecularmarkersneedtodevelopandimprove.Keyolecularmarker；Chinesemedicinalmaterials；Identification针对我国药材种类繁多,来源复杂且品种混淆情况严重的状况,为了保证临床用药的安全及质量和疗效,.freelplesequencerepeatISSR)和AFLP(AmplifiedrestrictionfragmentPolymorphism)。第3类
5、是以DNA序列为核心的分子标记技术,其代表性技术有ITS(interialtranscribedspaoers)测序分析技术。本文仅就最近十几年来DNA分子标记技术在中药鉴定方面的应用作一分析，并就其应用前景进行讨论和展望。1经典的DNA分子标记技术此类技术的代表是限制性片断长度多态性(RestrictionFragmentLengthPolymorphism，RFLP)。RFLP是最早发展的分子标记，是由Bostein首先提出.freelan最先应用于品种鉴别和品系纯度的测定，这是最早发展的分子标记技术。其基本原理是利用限制性内切酶酶切不同个体基因组DN
6、A后，与同位素或非同位素探针标记杂交，从而显示与探针含同源顺序的酶切片段在长度上的差异。RFLP探针的来源主要是RG克隆和cDNA克隆，其中cDNA探针保守性较强，许多同科物种cDNA探针都可以作为通用探针。在实际应用过程中，人们普遍感到经典的RFLP技术须经酶切、电泳、Southern转移、与探针杂交、放射自显影等步骤,在实际应用中很不方便，费时费力,并受到探针来源的限制，多态性检出效率低(只能检测探针长度内切酶识别位点上的变异)。同时要求的DNA量较大,实验材料必须新鲜,因此难以适用于干燥药材的鉴定,目前在中药鉴定领域已很少使用,已归为被淘汰的技术。在
7、多源性中药材如伞形科北沙参、柴胡,菊科苍术属豆科甘草属,羽扇豆属（Lupinussp．），YamazakiM,茄科澳茄属(Duborsias)MizukamiH,3种苍术MizukamiH的基原鉴定、资源分析及其地理品系(居群)间亲缘关系研究方面有了一些报道。2基于PCR的DNA分子标记技术此类标记技术的代表为:RAPD（RandomAmplifiedPolymorphicDNA)、简单序列重复间区标记技术(inter-simplesequencerepeatISSR)和AFLP(AmplifiedrestrictionfragmentPolymorphi
8、sm)。2.1随机扩增片段长度多态性标记(RandomAmplif
