新生SD大鼠坐骨神经Wallerian变性规律及其S-100蛋白表达和雪旺细胞增殖研究.doc

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1、新生SD大鼠坐骨神经Wallerian变性规律及其S-100蛋白表达和雪旺细胞增殖研究【摘要】目的:了解新生SD大鼠周围神经Wallerian变性不同时间点S-100蛋白表达变化及对雪旺细胞增殖的影响。方法:10d龄SD大鼠坐骨神经进行结扎预变性，分别于术后24h、3d、5d、7d和9d，进行雪旺细胞培养和S-100免疫组织化学染色观察。结果:在损伤周围神经的近端发生可逆性变性，远端则发生永久性Wallerian变性。实验组雪旺细胞增殖速率与S-100蛋白阳性染色率均优于对照组，7d组增殖能力达到

2、高峰，S-100蛋白阳性染色率约51%～56%，与对照组比较差异有显著性。结论:新生SD大鼠周围神经受损后变性过程类似于经典的Wallerian变性，且能在变性中期获得活力较强及倍增时间较短的雪旺细胞。【关键词】雪旺细胞Wallerian变性人工神经组织工程Abstract:Objective:TostudytheS-100expressionchangeandtheeffectofreproductiveactivityonSchwanncellsatdifferenttimepointsdur

3、ingWalleriandegenerationoftheperipheralnerveoftheneonatalSDrats.Methods:Thesciaticnervesofthe10-dayratswereligatedandpre-degeneratedandtheexperimentalresultwasanalyzedwiththemethodsofSchwanncellscultureandS-100proteinwaspost-operativelyobservedin24hou

4、rs,the3thday,5thday,7thdayand9thday,respectively.Results:Thereversibledegenerationcouldtakeplaceattheproximalextremityofthedamagedperipheralnerve,butthepermanentWalleriandegenerationtookplaceatthedistalextremity.ThereproductiverateofSchwanncellsandthe

5、positivestainingrateintheexperimentalgroupwerebetterthanthatofthecontrolgroup.Thereproductiveabilityinthe7thdaygroupreachedthepeakandthepositiverateofS-100proteinwasabout51%～56%inthe7thday.Ithadsignificantdifferencewhencomparedtothecontrolgroup.Conclu

6、sion:ThedegenerativeprocessofdamagedperipheralnerveoftheneonatalSDratsissimilartotheprocessofthetypicalWalleriandegeneration.ThestrongerreproductiveactivityandtheshorterdoublingtimeofSchwanncellscanbeobtainedduringthemiddlestageofWalleriandegeneration

7、.Keywords:Schwanncell;Walleriandegeneration;artificialnerve;tissueengineering周围神经受到卡压、断裂等损伤后，在损伤远端将不可避免发生Wall8erian变性，雪旺细胞呈阶段性增殖，为神经轴突再生修复提供神经营养因子。笔者利用这一现象对成年大鼠周围神经作预变性，在其增殖期内取材培养以获取激活态雪旺细胞[1]；另有研究表明，新生动物来源性雪旺细胞比成年动物增殖活性高。本实验对新生10d龄SD大鼠坐骨神经进行结扎预变性，参照成

8、年大鼠经典Wallerian变性规律，在变性后不同时间点取材，进行雪旺细胞培养及坐骨神经S-100蛋白免疫组织化学染色观察，并与未预变性组对比，观察并分析新生SD大鼠Wallerian变性的规律。1材料和方法1.1材料与试剂1.1.1实验动物：10d龄SD大鼠，雌雄不限，体重25～30g（东南大学医学院实验动物中心提供）。1.1.2实验用主要试剂与仪器：CO2培养箱（HeraeusBB5060uv型），倒置显微镜（NikonTS100型），高速台式离心机（TDL-16G），Ⅱ型胶原