细菌总论8细菌感染检查与防治原则课件

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1、第八章细菌感染的诊断与防治原则LaboratoryDiagnosisandPreventionofBacterialInfections病原生物学教研室第一节细菌感染的诊断DiagnosisofBacterialInfections查找病原菌细菌学诊断检测抗原及代谢物核酸检测血清学诊断:检测血清中特异抗体为目的细菌感染的主要诊断方法:1、临床标本采集与运送2、细菌分离培养与鉴定一、检测病原菌及代谢物1、实验室前正确的微生物标本采集和运送;2、实验室准确的病原学实验室诊断技术;3、实验室后依据试验结果采取合适的治疗。

2、哪个阶段误差发生率最高60%以上实验误差发生在分析前97年意大利著名检验专家对急诊检验误差的原因和发生率进行统计。结果显示检验前期的误差约为68.2%,而检验中期和后期的误差率为13.3%和18.5%。2007年,该专家又进行了类似统计,检验前期的误差发生率仍高达61.9%。摘自:(1)标本采集与运送的原则及早采集,使用抗菌药物之前。根据病程采取不同的临床标本。严格无菌操作,避免杂菌污染。采集后尽快送检,妥善保护。取高风险标本时,注意安全性。做好标记,注明来源和检验目的。标本容器必须符合标准……(2)标本不合格的常

3、见原因采集时间错误标本量不足标本采集延误未及时正确运送容器或暂存条件错误标本信息不全不符合无菌操作(3)最有价值的细菌学检测项目血液培养脑脊液培养胆汁培养胸腹水培养关节液其他无菌体液或分泌液一般检验程序:直接涂片镜检镜检形态↗生化反应标本→分离培养→可疑菌落血清学鉴定↘↑↘药敏试验增菌动物试验2、病原菌分离培养与鉴定形态、溶血性、色素等初步鉴别细菌感染性疾病最可靠的方法“金标准”选取可疑菌落沉淀反应协同凝集试验免疫荧光法对流免疫电泳二、病原菌的抗原检测酶免疫测定(EIA)胶体金标记等核酸杂交技术PCR技术菌体SPA

4、FcFab抗原协同凝集试验核酸杂交PCR技术基因芯片技术三、病原菌核酸检测用已知的细菌或其特异性抗原去检测患者体液中有无相应抗体以及抗体效价的动态变化,可作为某些感染性疾病的辅助诊断。因为一般采取病人血清进行试验,故称血清学诊断。四、血清学诊断适用于抗原性较强、病程较长的疾病诊断,最好采取患者急性期和恢复期双份血清标本。当恢复期的抗体效价比急性期升高≥4倍时,才有诊断价值。不受抗生素使用的限制,敏感性高;*常用的血清学诊断试验凝集试验:肥达反应、外斐试验沉淀试验:RPR、VDRL补体结合试验:检测Q热柯克斯体中和试

5、验:抗O试验ELISA:检测炭疽杆菌保护性抗体第二节细菌感染的特异性防治特异性防治是应用获得性免疫的原理给机体注射或服用病原微生物抗原或特异性抗体,以达到预防和治疗疾病的目的,这种方法称为人工免疫。自然主动免疫:患病、隐性感染主动免疫人工主动免疫:接种疫苗、类毒素等自然被动免疫:通过胎盘、初乳被动免疫人工被动免疫:注射抗毒素、转移因子丙种球蛋白、获得性免疫的产生的方式指人为地将疫苗(vaccine)或类毒素接种于人体,刺激机体主动产生特异性免疫力,从而对相应病原体感染产生抵抗作用的措施。主要用于预防微生物感染。一、

6、人工主动免疫1、死疫苗:用理化方法将免疫原性强的细菌杀死制成的。如百日咳、伤寒、霍乱、斑疹伤寒、流行性脑膜炎等。2、活疫苗:用减毒或无毒的病原体制成,如BCG、鼠疫、脊髓灰质炎和炭疽等的疫苗。常用人工免疫制剂活疫苗与死疫苗的比较活疫苗死疫苗接种次数1次2-3次 接种量小较大 接种反应轻重 免疫效果较好,维持1-5年差,维持0.5-1年 毒力回升有可能不可能 安全性有潜在危险性安全性好 疫苗稳定性相对不稳定相对稳定 保存不易保存易保存3、基因工程疫苗将编码有效抗原的目的基因插入适当载体,形成重组DNA,再导入宿主细胞

7、,使目的基因表达大量有效抗原成分,由此制备成基因工程疫苗。如把HBsAg基因插入酵母细胞中,成功表达并制备HBsAg疫苗。利用细菌保护性抗原制成不含核酸的疫苗。此种疫苗免疫原性弱,需加佐剂或与类毒素结合成偶联疫苗,以加强免疫原性。如肺炎链球菌荚膜多糖疫苗、钩端螺旋体外膜蛋白疫苗等。4、亚单位疫苗将能编码引起保护性免疫应答的病原体免疫原基因片段和质粒载体直接注射入宿主体以表达目的免疫原,进而产生特异性体液免疫和细胞免疫的新型疫苗。5、核酸疫苗或称DNA疫苗是外毒素经0.3~0.4%甲醛处理,失去毒性仍保持抗原性的生物

8、制品。例如白喉类毒素、破伤风类毒素等。加入适量的磷酸铝或氢氧化铝等制成精制的类毒素,能延缓在体内吸收速率,免疫效果更好。(二)类毒素(toxoid)二、人工被动免疫指输入含特异性抗体的免疫血清、制备好的免疫细胞、免疫球蛋白等,使机体立即获得免疫力的过程。用于传染病紧急预防和治疗,但维持时间短。常用的人工被动免疫制剂有:(一)抗毒素(二)抗菌血清(三)丙种球蛋

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