实训 酵母菌霉菌的形态观察及大小的测定ppt课件

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1、实训酵母菌、霉菌的形态观察及大小的测定1234（一）实训目的掌握观察酵母菌和霉菌形态的基本方法；观察酵母菌和霉菌的形态特征；学习使用显微测微尺测量微生物大小。（二）实训原理美蓝是一种无毒性的染料，酵母菌活细胞不着色，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，通过美蓝染液水浸片可以观察酵母菌的形态和出芽生殖方式，以及区分酵母菌的死细胞和活细胞。测量微生物细胞大小可用显微镜测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺。用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长

2、度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，计算出细胞的实际大小。（三）材料和用具啤酒酵母、大肠杆菌、青霉菌、曲霉菌、根霉菌；0.1%的吕氏美蓝染色液、乳酸石炭酸棉蓝染色液；显微镜、玻璃纸、无菌载玻片、无菌盖玻片、无菌平皿、接种环、镊子、解剖针、酒精灯、无菌培养皿、U形玻棒、恒温培养箱、超净工作台等。玻璃纸培养观察---向霉菌的斜面试管中加入5ml无菌水，制成孢子悬液，将已灭菌的玻璃纸平铺在沙保培养基平板上，贴紧，吸取0.2ml孢子悬液均匀地涂布于玻璃纸表面，盖好培养皿盖，放入25℃～30℃的培养箱中培养48h；揭开皿盖，剪取一小块长有菌丝

3、的玻璃纸，贴在载玻片上，置于显微镜下观察。（3）菌落的形态观察认真观察酵母菌和各种霉菌的菌落大小、颜色、形状等特征。2．真菌大小的测定（1）放置目镜测微尺（2）放置镜台测微尺（3）校正目镜测微尺先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央调焦，看清镜台测微尺刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度线和镜台测微尺的刻度线平行，利用移动器，使两个测微尺在某一区域内两刻度线完全重合，分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺各自的格数。（4）计算已知镜台测微尺每格长10μm，根据下列公式即可计算出在不同放大倍数下，目镜测微尺每格代表的实际长度。

4、两重合线间镜台测微尺格数目镜测微尺每格长度（μm）=×10两重合线间目镜测微尺格数（5）菌体大小的测定目镜测微尺校正完毕后，取下镜台测微尺，换上菌体染色制片，校正焦距使菌体清晰，转动目镜测微尺（或转动染色标本），测出待测菌的长和宽各占几小格，将测得的格数乘以目镜测微尺每小格所代表的长度，即可换算出此单个菌体的大小值，在同一涂片上需测定10至20个菌体，求出其平均值，才能代表该菌的大小。一般是用对数生长期的菌体来进行测定。（6）测定完毕及时清场等。（五）实训结果填写记录等（六）思考题比较显微镜下细菌与霉菌形态上的异同？为什么更换不同放大倍数目镜

5、或物镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测尺校正？在不改变目镜和目镜测微尺，改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时，其测定结果是否相同，为什么？