肌酸激酶MB型同功酶质量测定SOP_MMB临床意义_检验科生化项目SOP

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1、肌酸激酶同功酶质量测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理MMB方法是基于“三明治”原理的一步式酶免疫分析法。样本是利用带有具体针对CKB亚基的单克隆抗体涂层的二氧化铬粒子以及轭合物试剂（标有β-吡喃半乳糖苷的具体针对CKMB同功酶的单克隆抗体）孵育的标本与包被CKB亚基特异的单克隆抗体的二氧化铬颗粒及结合物（被CKMB同功酶特异的单克隆抗体标记的β半乳糖苷酶）一起孵育。在孵育过程中会形成一个由颗粒/CKMB/结合物组成的三明治式的结构，没有结合的结合物可通过磁性分离和清洗来清除，结合了三明治的β-吡喃半乳糖苷与一个发色底物氯酚红-β-d-吡喃半乳糖苷（CPRG）结合，CPRG水解释放色

2、基（CPR）。患者样本中所呈现的CKMB的浓度直接与由于在577nm处测量的CPR的形成而导致的颜色变化的比率成比例。CKMB+CrO2-Ab+CrO2-Ab-CKMB-F(ab′)2-β-gal+CrO2-AbF(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷+F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷CrO2-Ab-CKMB-F(ab′)2-β-gal+清洗液CrO2-Ab-CKMB-F(ab′)2-β-gal+CrO2-AbCrO2-Ab+F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷（转移到比色杯）CPRG（在577nm处不吸收）CrO2-Ab-CKMB-F(ab′)2-β-galCPR（在577nm处吸收）2标本采集与处理2

3、.1采血方法空腹不抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存室温保存，及时送检和检测。样本在室温下可存储12小时，在4℃下可存储3天，在–20℃下冷冻保存1个月。2.3注意事项推荐选用血清。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~2孔为结合物，液体；3~4孔为抗体-CrO20.9mg/ml，片剂；5~6孔为CPRG15.7mM，片剂；7孔为底物稀释液缓冲液175mM，液体；8孔为铬稀释缓冲液200mM，液体。3.1.2试剂准备肌酸激酶同功酶质量测定文件编号：版本号：页码：第页共页直接使用。3.1.3试剂保存试剂

4、2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD质控液。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏与2-8℃的冰箱内。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位

5、置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保

6、存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存直接使用，2~8℃保存。5.2校准条件肌酸激酶同功酶质量测定文件编号：版本号：页码：第页共页在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPo

7、sition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NE