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《肌酸激酶mb型同功酶质量测定sop_mmb临床意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、1检测原理MMB方法是基于“三明治”原理的一步式酶免疫分析法。样本是利用带有具体针对CKB亚基的单克隆抗体涂层的二氧化珞粒子以及辘合物试剂(标有B•毗喃半乳糖背的具体针对CKMB同功酶的单克隆抗体)孵育的标木与包被CKB亚基特异的单克隆抗体的二氧化铅颗粒及结合物(被CKMB同功酶特异的单克隆抗体标记的B半乳糖苜酶)一起孵育。在孵育过程中会形成一个由颗粒/CKMB/结合物组成的三明治式的结构，没有结合的结合物可通过磁性分离和清洗来清除，结合了三明治的B•毗喃半乳糖昔与一个发色底物氯酚红-P-d-O
2、tt喃半乳糖昔(CPRG)结合，CPRG水解释放色基(CPR)。患者样本中所呈现的CKMB的浓度直接与由于在577nm处测量的CPR的形成而导致的颜色变化的比率成比例。CKMB+Cr02-Ab+CrO2-Ab-CKMB-F(ab7)2-p-gal+CrO2-AbAF(abz)2-P-毗喃半乳糖苜+F(ab‘L-卩-毗喃半乳糖苜CrO2-Ab-CKMB-F(ab')2-3-gal+清洗液CrO2-Ab-CKMB-F(ab')2-0-gal+CrO2-Ab>CrO厂Ab+F(ab/)2-p-毗喃半乳
3、糖昔(转移到比色杯)CPRG(在577nm处不吸收)CrO厂Ab-CKMB-F(abz)2-p-galCPR(在577nm处吸收)►2标本采集与处理2.1采血方法空腹不抗凝静脉血2〜3ml。2.2标本保存室温保存，及时送检和检测。样本在室温下可存储12小时，在4°C下可存储3天，在-20°C下冷冻保存1个月。2.3注意事项推荐选用血清。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1〜2孔为结合物，液体；3~4孔为抗
4、体.Cr020.9mg/ml,片剂；5~6孔为CPRG15.7mM,片剂；7孔为底物稀释液缓冲液175mM,液体；8孔为銘稀释缓冲液200mM,液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8°C保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD质控液。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全口动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品一离心->上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。4.2样品签收严格按照标本接
5、收程序签收标本。4.3标本处理以2500〜3000r/min,离心6〜lOmin,分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏与2-8°C的冰箱内。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按FkENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在PatientName处选择性输入病人名字，按enter,在SampleNo处输入样品号，按ente「在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需耍选择相应的按键
6、改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。2.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。2.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。2.4.4检验后标木保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序3.1校准品准备和储存直接使用，2〜8°C保
7、存。3.2校准条件页码：第页共页在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。2.3校准程序主屏幕按F5:PR0CESSCTRL-F1:CALIBRATION,按enter-*F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator^校准液货号CalibratorProduct和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个水平
8、的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN-F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序3.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。2.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为0.5-300ng/mL,对于超过测定线性范围的结果，用样
