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《肌酸激酶mb型同工酶测定sop_ckmb临床意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、版本号:1检测原理CKMM同工酶的活性受--种CK-M亚单位的特异抗体的抑制。CKMB的CK-B亚单位的活性则得到测定。CK催化磷酸从磷酸肌酸到腺昔二磷酸(ADP)的可逆的转磷酸过程，产生腺昔三磷酸(ATP)o在由己糖激酶(HK)进行催化的反应屮ATP对葡萄糖进行磷酸化，生成葡萄糖-6-磷酸盐。然后，用葡萄糖-6-磷酸脱氢酶来催化葡萄糖-6-磷酸盐和烟碱腺卩票吟二核廿酸(NAD+)的反应，生成还原的烟碱腺嚟吟二核昔酸(NADU)o单磷酸腺昔(AMP)和1,5-二［腺#-5-五磷酸(AP5A)］被添加来抑制腺昔酸激酶。由于形成NADPH而在340nm处发生的吸光度变化，与
2、CK-B亚单位的活性成正比，可以使用双波长(340,405nm)技术来测量。肌酸+ATP磷酸肌酸+ADPATP+葡萄糖ADP+葡萄糖-6-磷酸盐M計+葡萄糖-6-磷酸盐+NADG-6-PDII炉-磷酸葡萄糖酸+NADPH+(H)2标本采集与处理2.1采血方法空腹采不抗凝静脉血2〜3ml。2.2标木保存采集后应及时送检。如果不能及时送检，应将标本及时离心后分离血清，-20°C可保存30d。2.3注意事项推荐选用血清。不应使用含有EDTA、肝素钠或草酸钾的采血管。酶活性的高低易受标本采集时间的影响较大。避免溶血、脂血、黃疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品(上海
3、)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1〜5孔为磷酸肌酸13mM,葡萄糖12mM,NAD+1.6mM,ADP1.5mM,AMP7.1mM,AP5A6.1um,N-乙酰半胱氨酸23mM,片剂;6孔为抗CK-MO.25mg/mL,S糖激酶4.5U/mL,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶2.7U/mb,缓冲液，液体。2.1.2试剂准备直接使用。肌酸激酶同工酶测定版本号：2.1.3试剂保存试剂2-8°C保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全口动生化分析
4、系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品一离心->上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500-3000r/min,离心6〜lOmin,分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8°C保存。4.4标本检测3.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按FkENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在PatientName处选择性输入病人名字，按enter,在SampleNo处输入样品号，按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相
5、应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标木类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。2.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。2.4.4检验后标本保存标本检验完成后用釆血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序3.1校准品准备和储存直接使用，2〜8°C保存。2.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号
6、、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。肌酸激酶同工酶测定版本号:2.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL-F1:CALIBRATION,按enter-F2:SET-UP&RUN,按项冃键选择所需耍校准的项H名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator.校准液货号CalibratorProduct和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架匕按F7：L
7、OAD/RUN-F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序3.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10〜・70°C可保存到瓶身有效期，未开启2-8°C可保存90d,开启后2〜8°C可保存30d。2.2质控水平和分析批长度每24小至少进行--批，每批2个浓度水平。2.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为0~125U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。8生物
