免疫组化在病理诊断中的应用课件

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1、免疫组化在病理诊断中的应用北京友谊医院病理科柳玮华免疫组化介绍免疫组化原理Enlivision染色方法免疫组化的使用范围各系统肿瘤的抗体表达免疫组化的原理根据抗原和抗体特异性反应的免疫学原理，应用标记抗体检测组织中未知抗原的方法。抗原+抗体（标记）→抗原抗体复合物通过抗原和抗体的特异性结合检测组织中的化学成分（蛋白—抗原）显示系统：抗原抗体复合物+检测系统将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体（即EnVision）PrimaryAntibodyPolymercomplexSubstrate-chromogensolutiontissueEnlivis

2、ion染色方法(1)、将切片捞至APES胶片上，放入60℃温箱中烘烤1小时。(2)、经二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水后流水冲洗。(3)、过3％H2O2中20min后流水冲洗。(4)、修复高火3min后，低火15min后，自然冷却至室温。(5)、取出玻片放至湿盒，PBS冲洗，3minx3。擦干玻片，每张玻片加1滴或50μl的第一抗体40min。(6)、PBS冲洗，3minx3。擦干玻片，每张玻片加1滴或50μl的聚合物增强剂(试剂A），室温孵育20min。(7)、PBS冲洗，3minx3。擦干玻片，每张玻片加1滴或50μl的酶标鼠/兔聚合物(试剂B），室温下孵育30m

3、in。(8)、PBS冲洗，3minx3。擦干玻片，每张玻片加2滴或100μl的DAB液，显微镜下观察，10min显色。(9)、流水冲洗，苏木素复染1-2min，0.1％盐酸分化，自来水冲洗后返蓝。(10)、梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封片。免疫组化的使用范围组织学标本中的应用细胞块中的应用各系统肿瘤的抗体表达对肿瘤进行来源分类上皮性肿瘤的标记物CK间叶肿瘤的标记物Vimentin淋巴造血系统肿瘤的标记物LCA神经内分泌肿瘤的标记物Syn、CgA、CD56各系统肿瘤的抗体表达上皮性肿瘤中的腺癌CK7+CK20-Villin+Villin-可见于：胃腺癌

4、(41.67%)、乳头状肾细胞癌(17.39%)、乳腺浸润性导管癌(5.36%)、卵巢浆液性腺癌(3.7%)少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、嫌色细胞癌、前列腺癌、直肠腺癌、乳腺浸润性小叶癌、卵巢粘液性癌。可见于：乳腺浸润型小叶癌(100%）、肺腺癌(95.83%）、乳腺浸润型导管癌(78.57%)、卵巢浆液性腺癌(70.37%）、嫌色细胞癌(66.67%）、卵巢粘液性腺癌(37.5%）、肺鳞癌(11.43%）、前列腺癌(9.09%）、直肠腺癌(2.78%）、胃腺癌(2.78%）、肾透明细胞癌(2.33%）。少见于：肺小细胞癌、乳头状肾细胞癌。

5、CK7+CK20+Villin+Villin-可见于：胃腺癌(13.89%）、卵巢粘液性腺癌(12.5%）、直肠腺癌(5.56%），乳头状肾细胞癌(4.35%）少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌、乳腺癌、卵巢浆液性癌。可见于：卵巢粘液性腺癌(12.5%）乳腺浸润性导管癌(3.57%）、胃腺癌(2.78%）、直肠腺癌(2.78%）。少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、嫌色细胞癌、前列腺癌、乳腺浸润性小叶癌、卵巢浆液性癌。CK7-CK20-Villin+Villin-可见于：乳头状肾细胞癌(43.47%）、

6、胃腺癌(18.06%）、直肠腺癌(16.67%）、卵巢粘液腺癌(12.5%）、嫌色细胞癌(11.11%）、前列腺癌(4.54%）。少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、乳腺浸润型导管癌、乳腺浸润性小叶癌、卵巢浆液性癌。可见于：肺小细胞癌(100%）、肾透明细胞癌(42/43，97.67%）肺鳞癌(88.57%）、前列腺癌(86.36%）、乳头状肾细胞癌(34.78%）、嫌色细胞癌(22.22%）、卵巢浆液腺癌(18.52%）、乳腺浸润型导管癌(16.07%）、胃腺癌(13.89%）、直肠腺癌(5.56%）、肺腺癌(4.17%）。少见于：乳腺浸润性小

7、叶腺癌、卵巢粘液腺癌。CK7-CK20+Villin+Villin-可见于：直肠腺癌(52.78%)、卵巢粘液性腺癌(25%)、胃腺癌(6.94%)、卵巢浆液性癌(3.7%）。少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、嫌色细胞癌、前列腺癌、乳腺浸润性导管癌、乳腺浸润性小叶癌。可见于：直肠腺癌(13.89%）、卵巢浆液性腺癌(3.7%）。少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、嫌色细胞癌、前列腺癌、乳腺浸润性导管癌、乳腺浸润性小叶癌、卵巢粘液性癌、胃腺癌1、软组织小圆细胞肿瘤CKVimEMALCANSECgADe

8、sS-100小细胞未分化癌+-+---