哮喘豚鼠感觉神经节内sp表达变化

《哮喘豚鼠感觉神经节内sp表达变化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、哮喘豚鼠感觉神经节内SP表达变化摘要:目的探讨豚鼠哮喘后颈静脉节和结状节P物质（SP）表达变化.方法成年雄性豚鼠随机分为正常组和哮喘组，采用免疫组织化学法观察豚鼠颈静脉节和结状节SP免疫反应神经元的变化.结果哮喘组颈静脉节和结状节SP免疫反应神经元数量发生了显著变化，哮喘组与正常对照组比较颈静脉节和结状节SP免疫反应神经元数量显著增加（P<0.01）.结论哮喘发病与颈静脉节和结状节SP免疫反应神经元密切相关，可能是导致哮喘持续发病的原因之一.　　Keya;sensoryganglion;substanceP;immuno-histochemist

2、ry　　Abstract:AIMToinvestigatethechangesinSPimmunore-activeneuronsinthejugulartubercleandnodoseganglionofasthmaticguineapigs.METHODSImmunohistochemistrybersofSPimmunoreactiveneuronsinthejugulartubercleandnodoseganglionofasthmagroup（P<0.01）.CONCLUSIONThereiscloserelationshipbet

3、munoreactiveneuronsinthejugulartubercleornodoseganglionandattackofasthma.Itmaybeareasonforpersis-tenceandprogressofasthma.　　0引言　　人们很早就注意到神经因素在哮喘发病机制中的作用，尤其是感觉神经与哮喘的关系越来越受到学者关注.研究［1-3］发现，P物质（substanceP，SP）、神经肽A（neurokinin，NKA）、降钙素基因相关肽（cal-citoningene-relatedpeptide，CGRP）等神经肽类可以引

4、发气道神经源性炎症，包括气道平滑肌收缩、血管通透性增加和炎性细胞浸润.研究发现哮喘患者支气管肺泡灌洗液（BALF）中SP，CGRP浓度均显著高于健康人群水平，特别是在急性发作时，SP和CGRP浓度进一步升高.同时有文献［4，5］证明哮喘发作时肺内SP和CGRP免疫反应阳性神经纤维数目和分布状态均发生非常明显的变化.而哮喘时肺内感觉传入神经胞体所在主要部位结状节和颈静脉节SP表达的变化如何尚不清楚.我们应用免疫组织化学方法观察了哮喘豚鼠结状节和颈静脉节SP的表达变化，为阐明哮喘发病机制提供实验依据.　　1材料和方法　　1.1材料成年雄性豚鼠20只，体质量

5、（300±50）g，由第四军医大学实验动物中心提供.随机分为2组，即哮喘组和对照组，每组10只.　　1.2方法　　1.2.1复制豚鼠哮喘动物模型实验的前1日腹腔内注射100g・L-1卵白蛋白（Sigma）1mL;第10日开始吸入10g・L-1卵白蛋白气溶胶30min，1次・d-1，连续14d.对照组用生理盐水代替卵白蛋白.　　1.2.2取材于实验第24日以戊巴比妥钠（40mg・kg-1，ip）麻醉豚鼠，开胸经主动脉灌注100mL生理盐水，继以新配制的4℃40g・L-1多聚甲醛加PB溶

6、液（0.1mol・L-1，pH7.4）500mL持续灌注90min，取出结状节和颈静脉节，入200g・L-1蔗糖PB溶液中，4℃过夜.　　1.2.3免疫组织化学染色恒冷箱切片，片厚14μm，贴片于10g・L-1明胶加50mg・L-1硫酸铬钾处理过的载玻片上，室温干燥30min后，以0.01mol・L-1PBS（pH7.4）浸洗，经800mL・L-1甲醇加30mL・L-1H2O2封闭10min，入30mL・L-1TritonX-100中30mi

7、n，KPBS浸洗3×10min，切片入兔抗SP血清（1∶4000，OncogeneScience），室温孵育24h.KPBS浸洗3×10min，入结合生物素的羊抗兔IgG血清（1∶500，Sigma），室温孵育3h，KPBS浸洗3×10min，入ABC复合物（1∶500，Sig-ma）室温孵育2h.葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍胺法显色.显色反应终止后，常规脱水透明，DPX封片.光学显微镜下观察照像.替代实验在各组切片中随机抽取切片，以KPBS代替一抗，其余步骤相同.　　统计学处理:以肺内气道为分析对象，显微镜下行图像分析，测量单位玻片面积内SP-IR阳

8、性细胞数.按x±s进行两组间t检验.　　2结果　　2.1对照实验替代实验未见有意义的染色.