哮喘豚鼠感觉神经节内sp表达变化论文

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1、哮喘豚鼠感觉神经节内SP表达变化论文.freela;sensoryganglion;substanceP;immuno-histochemistryAbstract:AIMToinvestigatethechangesinSPimmunore-activeneuronsinthejugulartubercleandnodoseganglionofasthmaticguineapigs.METHODSImmunohistochemistrybersofSPimmunoreactiveneuronsinthejugulartubercleandnodosegangl

2、ionofasthmagroup（P0.01）.CONCLUSIONThereiscloserelationshipbetmunoreactiveneuronsinthejugulartubercleornodoseganglionandattackofasthma.Itmaybeareasonforpersis-tenceandprogressofasthma.0引言人们很早就注意到神经因素在哮喘发病机制中的作用，尤其是感觉神经与哮喘的关系越来越受到学者关注.研究［1-3］发现，P物质（substanceP，SP）、神经肽A（neurokinin，NKA）、降

3、钙素基因相关肽（cal-citoningene-relatedpeptide.freela）1mL;第10日开始吸入10gL-1卵白蛋白气溶胶30min，1次d-1，连续14d.对照组用生理盐水代替卵白蛋白.1.2.2取材于实验第24日以戊巴比妥钠（40mgkg-1，ip）麻醉豚鼠，开胸经主动脉灌注100mL生理盐水，继以新配制的4℃40gL-1多聚甲醛加PB溶液（0.1molL-1，pH7.4）500mL持续灌注90min，取出结状节和颈静脉节，入200gL-1蔗糖PB溶液中，4℃过夜.1.2.3免疫组织化学染色恒冷箱切片，片厚14μm，贴片于10gL-1明胶

4、加50mgL-1硫酸铬钾处理过的载玻片上，室温干燥30min后，以0.01molL-1PBS（pH7.4）浸洗，经800mLL-1甲醇加30mLL-1H2O2封闭10min，入30mLL-1TritonX-100中30min，KPBS浸洗3×10min，切片入兔抗SP血清（1∶4000，OncogeneScience），室温孵育24h.KPBS浸洗3×10min，入结合生物素的羊抗兔IgG血清（1∶500，Sigma），室温孵育3h，KPBS浸洗3×10min，入ABC复合物（1∶500，Sig-ma）室温孵育2h.葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍胺法显色.显色反应

5、终止后，常规脱水透明，DPX封片.光学显微镜下观察照像.替代实验在各组切片中随机抽取切片，以KPBS代替一抗，其余步骤相同.统计学处理:以肺内气道为分析对象，显微镜下行图像分析，测量单位玻片面积内SP-IR阳性细胞数.按x±s进行两组间t检验.2结果2.1对照实验替代实验未见有意义的染色.2.2正常对照组感觉神经节SP┐IR细胞分布在结状节仅有极少量SP阳性标记细胞分布（Fig1），在颈静脉节则相对较多，SP主要表达于胞质中.2.3实验组感觉神经节SP┐IR细胞分布在结状节（Fig2）和颈静脉节（Fig3）的SP阳性标记神经元较正常对照组明显增多，表达SP的阳性

6、纤维也较多（Fig4）.图1－图4略2.4感觉神经节内SP┐IR细胞记数哮喘组结状节和颈静脉节的SP阳性标记神经元分别为（13±3）个mm-2和（35±7）个mm-2，较正常对照组的（8±2）个mm-2和（18±4）个mm-2明显增多，两者相差显著（P0.05）.3讨论呼吸道中60%的感觉神经随迷走神经走行，其胞体位于颈结状节和颈静脉节，后者发出中枢突随迷走神经根终止于孤束核、极间核（nucleusinferpo-laris）、三叉神经尾侧亚核以及颈髓背角浅层;另外，约40%的感觉传入经C7-T5脊神经节、交感神经颈上节分别传入脊髓背角浅层以及孤束核内.其神经纤

7、维主要是Aδ，C类纤维，在正常呼吸道主要分布于粘膜下层和外膜层，其神经肽为SP，NKA和CGRP.在哮喘动物模型及患者的血液和BALF中发现有异常数量的SP，NKA等感觉神经肽［6-8］，而SP又可以引起哮喘样的炎性反应，因此认为肺内感觉神经末梢释放异常量的神经肽与哮喘发作有密切关系.相应的实验［4，5］表明，哮喘发作时肺内SP和CGRP免疫反应阳性神经纤维数目增加，分布状态也发生非常明显的变化.现在认为肺内SP的释放过程是通过神经纤维的轴反射机制实现的，但这种认识仅限于肺内局部神经纤维，没有涉及神经元的作用，也忽略了感觉神经通过反射机制引起传出神经元的作用，因

8、而也无法阐明神经系统在哮