肝病患者抗lkm

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1、肝病患者抗LKM冯霞，闫惠平，刘艳敏，黄春，檀玉芬，刘妍，马冬梅【关键词】LKM-1;SLA/LP;肝炎;自身免疫性　　〔摘要〕目的回顾性研究在肝功能异常患者中肝肾微粒体抗体和可溶性肝抗原/肝胰抗体检测的意义和免疫特征。方法收集肝功能异常患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)＞40u/L的患者血浆5500例，分别检测肝肾微粒体抗体、可溶性肝抗原/肝胰抗体和相关自身抗体，查阅临床资料。结果5500例血浆中检测出SLA/LP阳性8例，占1.45‰，LKM阳性者4例，占0.73‰。12例阳性病例中，有乙型和丙型病毒性肝炎现症感染证据的分别有1例和2例

2、。大多数患者同时还伴有ANA、AMA、SMA和(或)LSP等抗体阳性。结论抗LKM-1和抗SLA/LP在我国肝病患者中出现的比例较低，抗LKM-1和抗SLA/LP是自身免疫性肝病的特征性抗体，检测此抗体对自身免疫性肝炎诊断具有重要的意义。　　〔关键词〕LKM-1;SLA/LP;肝炎;自身免疫性　　StudyonLKM-1andSLA/LPinChinesepatientsmumofluorescenceassayandeuroassay.ResultsOf5500seraonly4cases(0.73‰)ostcasesportantt

3、odiagnosisofAIH.　　〔Keymune　　抗肝肾微粒体抗体(liverkidneymicrosomalantibodies,LKM-1)和抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(anti-solubleliverantigen/liver-pancreas,SLA/LP)抗体被认为是自身免疫性肝炎的标志性抗体〔1〕。但国外也有报道〔2〕，这两种抗体不仅见于自身免疫性疾病,也出现于10%～15%的病毒性肝炎或其他免疫介导的疾病中,这给临床诊断带来了很多困难。为探讨这两种抗体在我国肝病患者中的存在状况和意义,本研究对收集到的肝功能异常患者包

4、括病毒性肝炎、酒精性肝病、自身免疫性肝病、不明原因的肝功能异常等血清5500例进行抗LKM和SLA/LP及相关抗体检测，现将结果报告如下。　　1资料与方法　　1.1一般资料1999年9月～2004年6月，收集北京佑安医院住院及门诊就诊的患者中丙氨酸氨基转移酶(ALT)大于40u/L的患者血清5500例，统一检测。　　1.2主要检测项目及方法　　1.2.1间接免疫荧光法(IFA，德国EUROIMMUN公司试剂)对5500例肝功能异常的患者的血浆标本检测了ANA、AMA、SMA、LSP和APCA。本方法采用HEp-2细胞和5种组织(猴肝脏和

5、心肌组织、大鼠肝、肾和胃组织)的冰冻切片作为抗原，以生物薄片技术将带有细胞和组织的6种切片组合成一个反应区。待检血清自1∶100起始稀释，与各种组织细胞共同孵育30min；加入异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗体结合30min；洗片、封片后荧光显微镜观察结果。组织或细胞内出现特征性的绿色荧光，血清稀释度≥1∶100为阳性〔3〕。　　1.2.2M2、LKM-1和SLA/LP的检测将高度纯化的各种抗原平行包被于检测膜条上，固定后将膜条放置于温育槽中加入1.5ml缓冲液振荡孵育15min，弃缓冲液加入稀释待检血清1.5ml，振荡孵育30min

6、。洗液清洗3次，每次5min，加入碱性磷酸酶标记第二抗体再振荡孵育30min。清洗，显色。检测膜条上出现蓝紫色条带为阳性，以试剂公司(EUROIMMUN试剂)提供的阳性条带位置标准图判定结果。　　1.2.3其他检测甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒标志物检测由我院临床检验中心及肝病研究所统一完成。肝脏活体组织学由我院病理科采用统一标准阅片。　　1.3诊断标准AIH的诊断参照国际自身免疫性肝炎工作组制定的诊断标准;病毒性肝炎及肝硬化按2000年病毒性肝炎防治方案诊断。　　2结果　　5500例血清中检测出SLA/LP阳性8例，占1.45‰，男女比

7、例2∶6，年龄33～75岁，平均53岁。其中6例无甲、乙、丙、丁、戊型病毒性肝炎现症感染证据，1例伴乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和抗HBe、抗HBc阳性，但检测HBVDNA为阴性。另外1例抗丙型肝炎病毒(HCV)IgG阳性，但HCV-RNA阴性。5500例血清中检测出LKM-1阳性者4例，占0.73‰，男女比例3∶1，年龄11～37岁，平均24.5岁。其中1例抗丙型肝炎病毒(HCV)IgG阳性，诊断为病毒性肝炎丙型，但HCV-RNA阴性。其他自身抗体检测结果：SLA/LP阳性的8例患者中，ANA均为阳性(滴度1∶320)，AMA(滴度

8、≥1∶320)者3例，全部M2阳性(＋＋)。SMA阳性者1例(滴度1∶320)。LSP、APCA和LKM-1未见阳性。LKM阳性的患者中ANA阳性1例(滴度1∶320)，APCA阳性者1例(滴度1∶1000