枸橼酸钠替代edta抗凝血无法纠正血小板聚集现象分析

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1、枸橼酸钠替代EDTA抗凝血无法纠正血小板聚集现象分析张利（河北省张家口市解放军251医院检验科河北张家口075000）【摘要】目的：分析同时对抗凝剂EDTA及枸橼酸钠所致的血小板聚集现象，观察仪器法和手工计数法对血小板聚集标木的不同检测结果，提高认识,防止因病例罕见而出现错报检验结果，造成误诊误沿。方法：用Sysmex-XN3000血液分析仪检测两组EDTA抗凝血和枸橼酸钠抗凝血，同时釆指血手工计数血小板和抗凝血涂片显微镜镜检。结果：EDTA抗凝血血小板数值与枸橼酸钠抗凝血结果相近，均明显低于血小板手工法结果，聚

2、集程度随时间的延K:而增加。结论：对于首次检测血小板数值减低的标木均应手工计数血小板或涂片镜检，以确认是否存在抗凝剂所致血小板聚集现象。对于多种抗凝剂均聚集的标木应采取立即检测及手工计数相结合的方法。【关键词】EDTA；枸橼酸钠；血小板聚集；血小板计数【中图分类号】R2855【文献标识码】B【文章编号】1003-5028（2015）5-0049-011资料和方法1.1血液标木标木来源于对两种抗凝剂均聚集的患者,每次病人抽两管血，EDTA–k2抗凝静脉血与枸橼酸钠抗凝静脉血，同时采指血做血小板手工镜检。

3、1.2仪器与试剂1.2.1Sysmex-xn3000血液分析仪（希森美康公司｝与配套试剂。1.2.2OLmpus显微镜。1.2.3按照操作规程配制的草酸铵血小板稀释液。1.2.4EDTA–k2真空抗凝管与枸橼酸钠真空抗凝管（作凝血检查抗凝1.2.5瑞-吉氏染液。1.3方法1.3.1仪器分析:Sysmex-xn3000血液分析仪用e-check质控品监控稳性，按操作规程操作。首先用常规方法检测EDTA&ndaSh;k2抗凝静脉血，然后以冋样方式检测枸橼酸钠抗凝静脉血。因两者为液体抗凝剂，其抗凝剂与血液之

4、比为1:9,故细胞计数结果应再乘1.1方为准确的结果，本文中所有抗凝管结果均为校正后的数值。1.3.2每例病人均采指血手工计数血小板-按文献［1］方法操作。1.3.3每例病人的EDTA抗凝血与枸橼酸钠抗凝血均涂片经瑞氏染色后显微镜镜检。2结果EDTA抗凝血血小板数值与枸橼酸钠抗凝血结果相近，均明显低于血小板手工法计数结果。。血小板数值详见表1此结果测定吋间为标本采集后30-40分钟测定结束。表13种方法检测血小板结果比较(109/L)NEDTA抗凝血枸橼酸钠抗凝血手工计数法530±1031&plus

5、mn;13173±35两种抗凝剂所抗凝标本均随时间延长发生聚集程度加剧的现象。标本离体20分钟后聚集变化趋于稳定。血小板数值详见表2表2两种抗凝剂所抗凝标本血小板数值随吋间变化表抗凝剂/时间(分钟)5101520EDTA抗凝血180±31110±2861±2320±15枸橼酸钠抗凝血182±30105±3059±2019±133讨论同时对抗凝剂EDTA及枸橼酸钠所致血小板聚集的病例非常少见

6、。EDTA–k2的抗凝原理是与血液中钟离子结合成螯合物，而使钟离子失去凝血作用，从而阻止血液凝固。因苏对血细胞形态影响很小，特别适用于全血细胞分析，己被ICSH认定并在临床广泛使用。但它偶尔可导致血小板聚集，发生血小板假性减少,EDTA导致血小板聚集的原因与血小板表面存在某种隐性抗原有关。EDTA可导致血由于在EDTA-K2作为抗凝剂的前提下出现的免疫介导，使血小板互相发生凝集现象［2】。Bragnani等认为，EDTA可导致血小板活化，因而改变血小板表面某种隐匿性抗原构象、与存在于血浆中的自身抗体结

7、合，激活PLA、PLC、AA、ADP、5-HT等活性物质［3】。这些活性物质又能活化血小板纤维蛋A原受体，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团，出现使血小板互相凝集现象。这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体直接作用于血小板膜糖蛋白Ilb/IIIa上，冋吋这种与血小板结合的自身抗体Fc端可与单核细胞或淋巴细胞膜上Fc受体结合，出现卫星现象。出现EDTA聚集一般采用枸橼酸钠［4］做为抗凝剂替代。枸橼酸钠所致血小板假性减少的机理有待进-步研究。由于此现象极少见，且枸橼酸钠抗凝血是解决EDTA依赖性血小板聚集的主要方法之一，故

8、血小板对枸橼酸钠产生聚集的现象非常容易被忽略而导致假性血小板减少，因此对此类标本应引起足够的重视。对于血小板聚集标本的测定应遵循的原则：所奋标本均应推片镜检，手工计数进行对照，标本采集后立即测定。参考文献：［1】叶砬妩，王敏三1全国临床检验操作规程［M］l第3版1南京:东南大学出版社，2006:136–1371［2】于波海，范艳玲,沈伟霞，等.乙二胺四乙酸依赖