奥曲肽对人卵巢癌细胞增殖影响的实验研究.doc

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1、奥曲肽对人卵巢癌细胞增殖影响的实验研究【摘要】目的探讨生长抑素类似物奥曲肽在体内对人卵巢癌细胞株SK0V3生长的影响。方法建立人卵巢癌细胞株SK0V3裸鼠移植瘤模型,随机分成4组:对照组、奥曲肽组、顺铂组及奥曲肽顺铂联用组,分别予生理盐水、奥曲肽、顺铂及两药联用处理,处死裸鼠后肿瘤标本采用流式细胞仪检测细胞周期,免疫组织化学法检测血管内皮生长因子的表达。结果各用药组瘤重、瘤体积、VEGF的表达均低于生理盐水组,但用药组两两间比较差异无显著性。结论奥曲肽能抑制体内人卵巢癌细胞株SKOV3生长,对肿瘤VEGF表达的抑制可能为其抑瘤机

2、制之一。【关键词】奥曲肽;卵巢癌;细胞周期;血管内皮生长因子Effectofoctreotideonthegrowthofhumanovariancancercelllineinexperimenta1study【Abstract】chtheeffectofoctrehumanovariancancero.MethodsMetastatumanovariancancerwlantationoftheovarK0V3intonudemice.AObjectiveToapproaotideonthegrowthofcelllineS

3、K0V3invivicmodelsimulatinghasestablishedbyimpiancancerce11lineSnimalswererandomlydividedandsubmittedtodifferenttreatmentgroups:controlgrouptreatedwithnormalsaline,octreotidegroupwithoctreotide,cDDPgroupwithcDDPincombinationgroup.Themicewerekilledandthetumorsampleswer

4、eisolated,distributionofcellcyclewasdeterminedbyflowcytometry,VEGFexpressionwasexaminedbyimmunohistochemistrywithVEGFantibody.ResultsTumorwEights,volumeandtheexpressionofVEGFwerelessintreatedmicethaninthecontrolmice(P[Keywords]octreotide;ovariancancer;cellcycle;VEGF生

5、长抑素(somatostatin,SST)是一种环状多肽类激素,由Brazeau等[1]于1973年从羊下丘脑中分离提取。现在认为SST对许多疾病如肿瘤、炎症、糖尿病、癲痫、早老性痴呆、帕金森病、亨廷顿舞蹈病以及艾滋病的发生、发展以及防治具有重要的意义[2]。奥曲肽(SMS-201995,0CT)为生长抑素8肽类似物,是第一个用于临床的生长抑素类似物,目前其主要用于肝癌、胃癌、胰腺癌的辅助治疗。目前国内外关于奥曲肽对卵巢癌作用的研究报道较少。本实验通过裸鼠移植瘤模型观察奥曲肽对卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响,并初探其作用机制。

6、1材料与方法材料(1)基础培养液:RPMI1640,加入10%小牛血清(杭州四季青生物公司)。(2)胰蛋白酶(上海华美公司):溶于D-Hanks液中配制成%浓度。(3)生长抑素类似物奥曲肽:由上海子能制药有限公司合成。(4)顺铝(Cisplatin):山东齐鲁制药厂产品,4°C保存。(5)人卵巢癌细胞株SK0V3:购自第四军医大学西京医院妇产科实验室。细胞置于370C,5%CO2培养箱中培养,%胰蛋白酶消化细胞成单细胞悬液。(6)雌性BALB/c-nu/nu裸小鼠:购自中国医学科学院实验动物研究所,体重18〜22g,SPF环境下

7、饲养。(7)兔抗人血管内皮生长因子单克隆抗体:购自北京中杉金桥生物技术有限公司。方法卵巢癌裸鼠移植瘤模型的建立将SK0V3细胞制成单细胞悬液,以5X106个细胞/只,接种于裸鼠右侧腋窝靠近背部皮下,共接种20只。药物干预移植瘤建模2周后将20只裸鼠随机分成4组,每组5只,4组分别为空白对照组、奥曲肽组、顺铂组、奥曲肽与顺铂联用组。空白对照组皮下注射生理盐水W0Ug/,1次/d;奥曲肽组皮下注射奥曲肽100Pg/,1次/d;顺铂组分别于成瘤后第1、8、15、22日腹腔注射顺铂4mg/kg;奥曲肽与顺铂联用组皮下注射奥曲肽100ug

8、/,l次/d,并于成瘤后第1、8、15、22日腹腔注射顺铂4mg/kg。用药4周后颈椎脱位法处死裸鼠,皮下剥离瘤体,称取肿瘤重量,游标卡尺测量肿瘤长径和短径,按公SV=ab2/2计算肿瘤体积。抑瘤率=(对照组瘤体积-实验组瘤体积)/对照组瘤体积X100%。肿瘤标

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