富含血小板血浆和rhbmp

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1、富含血小板血浆和rhBMP:蔡华雄,宋洁文,赵小朋,阮毅,郑美华,李海刚【摘要】【目的】研究自体富含血小板血浆(PRP)和人重组骨形成蛋白(rhBMP-2)对下颌骨组织形成的促进作用。【方法】成年新西兰白兔45只,随机分为3组,每组15只,选择右侧下颌骨为实验侧、左侧下颌骨为对照侧。A组右侧下颌骨缺损区放置明胶海绵和PRP,B组右侧下颌骨缺损区放置明胶海绵和rhBMP-2,C组右侧下颌骨缺损区放置明胶海绵、PRP和rhBMP-2,各组左侧下颌骨缺损区只放置明胶海绵。分别于术后2、4、8周各取5只兔子进行放射性核素99mTc-MDP

2、骨显像、X线片和组织学切片检查。【结果】A组动物右侧放射性核素计数在术后2、4周时明显高于左侧(Ρ<0.05);B组动物右侧放射性核素计数在第4周时高于左侧(Ρ<0.05),而在第2、8周时低于左侧(Ρ<0.05);C组动物右侧放射性核素计数在第2、4周时均高于左侧(Ρ<0.05),在第8周时两侧没有明显差别(Ρ>0.05)。【结论】PRP单独或与rhBMP-2复合均能促进下颌骨组织的增长。【关键词】富含血小板血浆;骨形成蛋白;骨再生]牙槽骨是支持、稳固牙齿、维护咀嚼功能的重要组织,由于炎症、外伤、肿

3、瘤、功能性萎缩等原因,牙槽骨非常容易吸收、丧失,进而影响咀嚼功能。牙槽骨组织的吸收、丧失,导致牙齿松动(牙周炎),义齿、种植牙修复困难,进行牙槽骨移植是重建牙槽骨的重要手段。关于牙槽骨的移植,主要是选择植骨材料的问题。随着医学的不断发展,人们已经发现了众多可供移植的材料,如羟基磷灰石/脱矿骨复合物、医学组织工程材料支架等[1、2],但至今为止尚未找到一种既安全、经济,又有理想效果的牙槽骨植骨材料。本实验通过同位素骨显影技术观察自体富含血小板血浆(plateletrichplasma,PRP)及人重组骨形成蛋白(rebinanthu

4、manbonemorphogeicprotein-2,rhBMP-2)对兔下颌骨缺损区骨组织代谢的影响,现报道如下。1材料和方法1.1材料45只健康成年新西兰白兔(南方医院实验动物中心提供),雌雄不限,体质量2.0~2.5kg,分笼饲养。人重组骨形成蛋白-2(rebinanthumanbonemorphogeicprotein-2,rhBMP-2),由广州威佳科技有限公司提供。自体富含血小板血浆(PRP),手术前制备。以明胶海棉作为PRP及rhBMP-2的载体。1.2PRP的制备0.03g/L戊巴比妥钠(0.03g/kg)腹腔注射

5、麻醉,从兔耳中央动脉抽取5mL自体血,装在预先放有0.5mL复方枸橼酸钠抗凝剂的10mL离心管中,参照Landeaserg法[3]进行PRP提取:将新鲜血分两次离心,第一次离心1000r/min(200×g)×10min,吸管吸取全部上清液至交界面下3mm,移至另一离心管,平衡后再次离心1000r/min(200×g)×10min,此时离心管中液体分为两层,吸取约3/4上清液弃掉,摇匀剩余液体,即为PRP,摇匀,备用。经检测,离心前血小板计数为336×109/L,离心后血小板计数为1498×109/L,离心后的血小板浓度是离心前的

6、450%左右。制作过程严格无菌操作。1.3手术与分组健康成年新西兰白兔45只,随机分为A、B、C3组,每组15只。每只兔在双侧下颌骨体部,即近犬齿、前臼齿根尖处建立骨缺损区,右侧为实验侧,其中A组放置PRP和明胶海绵,B组放置rhBMP-2和明胶海绵,C组放置PRP、rhBMP-2和明胶海绵;左侧为对照侧,均只放置明胶海绵。1.4实验方法0.03g/L戊巴比妥钠按0.03g/kg腹腔注射麻醉,显效后在手术区局部注射0.02g/L利多卡因。常规备皮、消毒、铺巾。沿下颌骨下缘作平行切口,长度为3~4cm,分层切开皮肤、皮下组织,暴露下

7、颌骨下缘及下颌骨颊面,用裂钻在下颌骨体部颊侧中下1/3处制备缺损区,长、宽、深分别为8mm×6mm×2mm,手术时使用生理盐水降温,术后使用庆大霉素注射液冲洗防止感染。缺损区制备后,兔子右侧:A组以明胶海绵加PRP填塞,B组以明胶海绵加rhBMP-2填塞,C组以明胶海绵加PRP及rhBMP-2填塞;左侧均以明胶海绵填塞。严密缝合伤口,分笼饲养。术后给予青霉素肌注预防感染,剂量为40万U/次,每天一次,持续3d。1.5观察指标1.5.1放射性核素骨显像各组分别在术后第2、4、8周时随机抽取5只大白兔,由耳缘静脉注射962MBq99m

8、Tc-MDP,3h后在全麻状态下将大白兔仰卧固定,取其下颌骨正面及双侧摄取相的静态骨显像。在双侧缺损区取约10mm×8mm的面积作为感兴趣区(regionofinterest,ROI),使用高分辨准直器γ照相机(MillenniumMG)进行骨显像

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