肌钙蛋白I测定SOP_CTNI临床意义_检验科生化项目SOP

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1、肌钙蛋白I测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理CTNI方法是基于双抗体夹心原理的一步法酶免疫测定。样本与用心肌肌钙蛋白-I分子的特异单克隆抗体包被的二氧化铬颗粒，和标记了心肌肌钙蛋白-I的特异单克隆抗体的结合试剂[碱性磷酸酶(ALP)]共同孵育，形成颗粒/心肌肌钙蛋白I/结合夹心。自由轭合物可通过磁性分离和清洗来清除。分离和清洗之后，颗粒/心肌肌钙蛋白-I/结合剂夹心转移到比色杯中，在那里，夹心结合的碱性磷酸酶触发扩增反应。使人造黄素腺嘌呤二核苷酸磷酸(FADP)脱去磷酸，生成黄素腺嘌呤二核苷酸

2、(FAD)。结合到apoD-氨基酸氧化酶(脱辅基的)并将其转换为活化的全D-氨基酸氧化酶。然后每个全D-氨基酸氧化酶分子生成多个分子过氧化氢(H2O2)，后者在有辣根过氧化物酶(HRP)的条件下，将3,5-二氯-2-羟苯璜酸(DCHBS)和4-氨基安替比林(4-AAP)转换为在510nm处吸光的有色产品。测定的颜色变化与患者样本中存在的心肌肌钙蛋白-I浓度成正比。cTnI+CrO2-Ab+Fab′-ALPCrO2-Ab-cTnI-Fab′-ALP+CrO2-Ab+Fab′-ALPCrO2-Ab-cTnI-

3、Fab′-ALP+CrO2-Ab+Fab′-ALP清洗CrO2-Ab-cTnI-Fab′-ALP+CrO2-Ab（转移到比色杯）FADPCrO2-Ab-cTnI-Fab′-ALPFAD+PiapoD-氨基酸氧化酶FAD全D-氨基酸氧化酶D-脯氨酸+O2全D-氨基酸氧化酶H2O2H2O2+DCHBS+4-AAPHRP颜色（在510nm处吸收）2标本采集与处理2.1采血方法空腹不抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存室温保存，及时送检和检测。样本在2~8℃下可存储14天，在–20℃下可保存8周。2.3注意事项推

4、荐选用血清。在存在EDTA、柠檬酸盐、草酸盐下采集的血样和含抗凝血剂不足的冷冻血浆，可能导致铬颗粒的凝结，不可以使用。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。肌钙蛋白I测定文件编号：版本号：页码：第页共页3.1.1试剂组成试剂船1孔为FADP0.056mg/mL，D-脯氨酸68.8mg/mL，片剂；2孔为Apo-D-氨基酸氧化酶0.23mg/mL，辣根过氧化物酶，过氧化物酶0.19mg/mL，DCHBS3.9mg/mL，4-AAP1.18mg/

5、mL，片剂；5孔为抗体-CrO21.6mg/mL，片剂；6孔为抗体-碱性磷酸酶，液体；7孔为缓冲液，稳定剂，液体；8孔为铬片剂稀释液，稳定剂，液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD质控液。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。

6、4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏与2-8℃的冰箱内。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按enter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:M

7、EXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行肌钙蛋白I测定文件编号：版本号：页码：第页共页样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存直接使用，

8、2~8℃保存。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot，以及最低值校准液在样