微生物学实验

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1、《微生物学实验》教学大纲课程类别：专业核心课总学时：36总学分：2开设学期：第二学期适用专业：生物技术及应用先修课程：有机化学实验，无机及分析化学实验一、本课程的性质与任务《微生物学实验》是生物技术及应用专业学生的实验类专业必修课，通过本课程的教学可使学生完整、全面的了解和掌握微生物学的基本理论和研究方法，使学生得到有关微生物实验技能的基本训练，进一步加深对微生物基础理论的理解，并力求达到系统地培养学生分析问题、解决问题的能力和实际动手能力，在实验中进一步提高学生的科学素质修养。二、教学目的与要求1.通过教师

2、示范、讲解与学生实际操作相结合方法，使学生牢固树立无菌概念，掌握显微镜的使用、生物染色技术、形态学观察的方法、微生物计数、培养基的配置和灭菌方法、微生物分离、纯化等基本操作技能，基本了解常用的仪器设备的基本原理、构造、使用方法及使用中的注意事项，树立严谨求实的科学态度，提高观察、分析问题和解决问题的能力，培养勤俭节约、爱护公物和相互协作的优良作风。2.本实验课内容包括验证性实验、综合性实验两个部分。验证性实验主要通过光学显微镜镜检观察方法进行教学，综合实验在教师指导下学生根据所掌握的理论基础和实验技能，由学生

3、自己动手完成。实验过程要求学生仔细观察实验现象，完整记录原始实验数据、结果，分析实验现象并认真填写实验报告。三、教学时数分配总学时：36学时。学时分配表章节实验内容实验性质学时实验一显微镜油镜的使用，与细菌形态观察验证3实验二培养基的制备、分装和灭菌验证4实验三环境和人体表面微生物的检查验证3实验四细菌的简单染色法验证3实验五细菌的革兰氏染色验证3实验六微生物纯种分离和接种技术综合3实验七微生物培养特征观察综合2实验八细菌的生理生化试验综合5实验九细菌总数的测定综合5实验十菌种常用简易保存方法综合3实验十一玻

4、璃器皿的清洗和包装其它2总计36四、实验内容和课时分配实验一显微镜油镜的使用，与细菌形态观察（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.了解普通光学显微镜油镜的原理；2.熟练掌握普通光学显微镜油镜的使用和保养方法；3.掌握各种微生物的主要形态特征。（二）技能要求1.掌握微生物绘图的基本技法；2.显微镜油镜的使用。实验内容：1.球菌的形态观察2.杆菌的形态观察；主要仪器设备：普通光学显微镜实验二培养基的配制、分装和灭菌（4课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.明确培养基的配制原理；2.掌握几种培养基成分、状态

5、、用途；3.了解各种灭菌方法的原理及应用范围；4.熟练掌握高压蒸汽灭菌的原理及应用范围。（二）技能要求1.掌握培养基的配制方法；2.掌握高压蒸汽灭菌锅加压蒸汽灭菌的操作方法。实验内容：1.牛肉膏蛋白胨培养基的配制；2.高压蒸汽灭菌锅加压蒸汽灭菌。主要仪器设备：高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌器、电子天平实验三环境和人体表面微生物的检查（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.初步了解周围环境中微生物的分布概况；2.懂得无菌操作在微生物学实验中的重要性；3.学会用无菌操作倒平板培养基的方法；4.掌握环境中不同样本的接

6、种方法；5.会识别不同种类微生物的菌落。（二）技能要求1.掌握环境样本采集的方法；2.掌握无菌操作倒平板培养基的方法；3.掌握环境中不同样本的接种方法；4.菌落识别技能。实验内容：1.平板培养基的制备；2.环境中不同样本的采集与处理；3.样本的接种；4.培养：37℃18~24h；5.结果观察：微生物的生长情况、菌落识别与描述。主要仪器设备：采土铲、各种灭菌的玻璃器皿、恒温培养箱等实验四细菌的简单染色法（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.掌握简单染色法的基本原理；2.掌握简单染色法的操作步骤及注意事项。

7、（二）技能要求1.掌握细菌涂片技术；2.掌握细菌涂片单染色技术；3.熟练镜检的方法。实验内容：1.细菌涂片的制备；2.固定：火焰固定3.染色：美兰染色、沙黄染色等4.水洗；5.干燥；6.镜检；7.清洗。主要仪器设备：普通光学显微镜实验五细菌的革兰氏染色（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.掌握革兰氏染色法的基本原理；2.掌握革兰氏染色法的操作步骤及注意事项。（二）技能要求1.掌握革兰氏染色制片的方法；2.掌握革兰氏染色初染的方法；3.掌握革兰氏染色媒染的方法；4.掌握革兰氏染色脱色的方法；5.掌握革兰氏

8、染色复染的方法；6.熟练镜检的方法。实验内容：1.制片；2.初染；3.媒染；4.脱色；5.复染；6.镜检；7.混合涂片染色。主要仪器设备：普通光学显微镜实验六细菌的纯种分离和接种技术（3课时）实验目的和要求：（一）知识要求1.掌握无菌操作技术；2.掌握平板划线法分离纯化微生物的原理与方法；3.学会几种接种技术。（二）技能要求1.掌握平板划线法分离纯化微生物的步骤与方法；2.学会几种接种技术。实验内容