大鼠弥漫性脑损伤后早期c

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时间:2018-10-29

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1、大鼠弥漫性脑损伤后早期c【摘要】目的观察大鼠弥漫性脑损伤后c—f0s基因表达的规律。方法采用marmarou的弥漫性脑损伤模型,分别于伤后15min,30min,lh,3h,6h,12h,24h取脑组织,运用免疫组化sabc法观察c—fos基因的表达。结果打击后15min时,即可观察到c—fos基因的表达,1h后表达明显增加,3h达到高峰,随着损伤时间的延长,阳性反应细胞逐渐减少,24h可见少量表达。表达呈弥漫性,以皮层、脑干最为明显,不同部位的变化趋势一致。对照组未见阳性反应细胞结论c—fos基因的表达规律可用于弥漫性脑损伤的早期鉴定及损伤经过时间的推断【关键词】弥漫性脑损伤;c—fos基

2、因;免疫组织化学;嗜银染色;损伤经过时间【中图分类号】r36【文献标识码】a【】1007—9297(某某年)01—0042—03studyontheexpressionofc-fosgeneintheearlystageofdifusebraininjuryinratsanditsforensicimplication.chenren—hui,l1yo’ong,chengli—bao.departmentofforensicpathology,edicalcollege,u241001【abstract】0bjectivetoinvestigatetheexpressionofc—fosge

3、neindiffusebraininjury(dbi).methodsbasedonmarmarousmodelofdbiandtookthesamplesat15min,30min,lh,3h,6h,12h,24hafterbraininjury.theexpressionofc—f0sgenemunohistochemicalsabc.resultsrheexpressionofc-fosgenecouldbedetectedat15minafterinjury,increasedatlhandpeakedat3h.positivecellsdecreasede.littleexpres

4、sion.i’hechangingtendencyofdiferentarease.rhecontrolgroupshomunohistochemistry;silverstaining;injurytime脑损伤是法医学鉴定中最常见的损伤,弥漫性脑损伤(diffusebraininjury.dbi)作为闭合性脑损伤的一种,多见于交通事故。c—fos基因属于即刻早基因家族(immediateearlygene,iegs),在正常情况下参与神经细胞的生长、发育、分化、记忆和信息传递过程,生理情况下不易被检测到。当神经组织受到病理性刺激如脑缺血、外伤等作用后,c—fos基因快速表达,02]因此被

5、称为快速反应原癌基因。c—fos基因表达是神经组织受伤害的早期指标。目前有关dbi后c—fos基因表达的文献很少,拟采用marmarou的弥漫性脑损伤模型.『31初步探讨大鼠dbi后c—fos基因表达的规律。材料与方法一、试验动物健康雄性sd大鼠48只f南京青龙山实验动物中心提供),体重300~320g,随机分成dbi15min、30min,1h,3h,6h,12h,24h组及及对照组,共8组。每组6只大鼠二、模型制作采用marmarou脑损伤模型,用1%戊巴比妥钠腹腔注射(30mg/kg),麻醉成功后,大鼠头部做中线切口,暴露颅骨.将直径10mm、厚3mm的打击垫片用高分子聚脂固定于颅顶的

6、冠状缝与人字缝之间的中央部.然后将大鼠俯卧固定已知厚度及弹性系数的海绵床上,待动物开始苏醒、有肢体活动时,移至一有机塑料管下端.垫片正对管中央。450g铁棒从2m高度自管内自由坠落至打击垫片上.立即移开海绵床以免二次损伤。三、组织处理及切片在设定的时间内处死动物:将动物过量麻醉后,断头取脑.打开颅骨后迅速用4%多聚甲醛液预固定:【简介】陈仁辉(1979一),男,安徽宁国人,硕士,主要从事闭合性颅脑损伤的研究。联系方式:+86—13855347401:e—mail:ccrhhotmail.corn法律与医学杂志某某年年第12卷(第1期)取大鼠全脑于4%多聚甲醛液后固定12h.沿大脑正中裂矢状切

7、开大脑、小脑、脑干,于正中切面左有外侧3mm处切取左有大脑皮质、脑以及脑干组织各l块,分别做常规石蜡包埋,切片厚5m。分别作he染色、嗜银染色及c—fos免疫组织化学染色四、试剂及方法rabbitanti—c—fos:dab显色试剂盒及sabc试剂盒(武汉博士德公司),按说明书进行操作。』f】pbs取代一抗、二抗作阴性对照,以细胞核fi{现黄色产物为阳性结果。硝酸银、氯化金、硫代硫酸钠、饱和氨水,按

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