枸杞多糖对ⅱ型糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制研究

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1、枸杞多糖对II型糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制研究孙桂菊，张勇，黄杰1，王少康，孙子林2,黄培林3(尔南大学公井卫生学院营养与食品卫生系，1南京市卫生监督所，2尔南大学附属中大医院内分泌科，3东南人学基础医学院病理学与病理生理学系，南京210009)【摘要】H的：观察枸杞多糖(LBP)对II型糖鉍病人鼠杼脏的保护作川及机制。方法：川链脲佐菌素(STZ)结合高脂饲料建立II型糖尿病大鼠模型，根据胰岛素敏感指数、糖耐S曲线下而积分为模型组，LBP低、中、高剂fi组120、40、80mg/(kgbw?d

2、)J,同时设立正常对照及正常高剂景对照组，试验期1个月。检测LBP对II型糖以病人鼠血淸糖基化终产物-肽(AGEs-P)、糖基化血红蛋A(HbAlc)及肾脏A介素-8(IL-8)含解:、1抒脏痫理变化的影响。结果：LBP讨降低11型糖尿病模型大鼠血清AGEs-P及血浆HbAlc与肾脏中IL-8含肾脏病变明显改善。结论：LBP可降低模型大鼠糖基化终产物的产生，减少肾脏IL-8的分泌，从而预防糖尿病肾病的发生。［营养学报，2006,28(1)：47-50J关键同：枸杞多糖；糖以病肾病；糖基化终产物；t

3、l细胞介素-8糖W肉肾祸(diabeticnephropathy,DN)足糖以炳慢性iflL管并发症之•-，其发牛.机制尚无定论，h前研究较多的足组织非酶糖菇化终产物(advancedglycosylationendproducts,AGEs)嘗积［1］、醛糖还原酶(aldosereductase,AR)活性改变［2］等。近年来又发现IL-8与DN发病有关L3j。枸杞多糖(Lyciumbarbarumpolysaccharides,LBP)是枸杞子有效成分之一。我们矜报道LBP具有降血糖作用，并n

4、J提高模型大鼠的胰岛素敏感桁数(ISI)。本研究主耍观察LBP对II型糖尿病人鼠肾脏保护作用及K机制。1材料与方法1.1样品LBP按相关文献⑸进行提取。1.2主要试剂、仪器链脈佐菌素(streptozotocin，STZ),Sigma公司产DNA自动扩增仪，TechneIncorporated；EPS604稳压穂流电泳仪，南;科宝仪器研究所；岛津-10A命效液相色谱仪，日本岛津公司；IS-1001凝胶成像系统，上海复U科技有限公司。i.3n型糖尿病大鼠模型的建立据文献H］建立n型糖鉍病动物模型，其

5、条件为：(丨)胰岛索敏感指数ISI=ln［l/(空腹血糖值X血清胰岛素水平)］，ISIS正常大鼠ISI的均值减1个标准差；(2)葡萄糖耐量实验曲线下側积＞26;(3)空腹胰岛素不小于正常大鼠的均值减一个标准差。1.4动物分组将糖尿病模型大鼠随机分为4组，分别为模型组(model)，继续给予高脂饲料，灌胃蒸馏水；LBP低、小、高剂景组，在给予高脂饲料的同吋湘胃给予LBP20、40、80mg/kgbwo同时设正常对照组和正常LBP菇剂朵组，喂普通饲料，p者灌胃给予LBP8()mg/kgbw。持续灌胃1

6、个月沿，动物断尾取血测定HbAlc、血清AGEs-P含S,处死后取肾脏进行病理学检査和用免疫组化及逆转录聚合酶链式反成(RT-PCR)进行肾脏IL-8mRNA含景测定。1.5指标测定1.5.1大鼠肾脏IL-8含量的测定：免疫组化法：试剂盒购tl福州迈新生物制剂公操作少骤按试剂盒说明书进行。人鼠竹脏组织50〜100mg,川异丙醇-乙醇-•步法离心提取RNA,使川晶芙生物工稈公司的试剂盘，采用RT-PCR技术对肾脏组织屮的mRNA进行逆转录扩增，以P-actin作为内参对照，PCR反应产物进行琼脂糖凝

7、胶电泳，在图像扫描仪K观察并扫描入电脑，用统计软件处理，得出H的条带与内参照条带的光密度比值。1.5.2血清AGEs-P的测定：流动注射分析法［6］。1.5.3血浆HbAlc的测定：采川德国拜耳公司的DCA2000型糖化血红蛋白分析仪测定。1.6统计方法数裾以x土s表示，采用SAS6.12统汁软件对数裾进行统计分析。2结果2.1LBF对血清AGEs和HbAlc含量的影响(表1)Table1TheeffectofLBPonAGEslevelinserumandHbAlclevelinplasmain

8、typeIIdiabeticrats(T土J)Group-BP(mg/kg•bw)nHbAlcinPlasma(%)AGEs-Pinserum(pg/ml)Model77.7±1.35.22±0.80LowLBP2086.3士1.3b3.07±0.45"MedLBP4075.8±1Jb3.01±0.84MHighLBP8085.2±0.9b2.73土0.84•NH8073.8±0.9"2.84±0.80wNC0103.8±O.7m2.87±0.56"Low=lowdosc^Med=