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1、丹参对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究作者：柳刚,关广聚,亓同钢,傅余芹,李学刚,孙云,吴涛,文蓉珠【关键词】链脲霉素糖尿病［摘要］目的：探讨丹参对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法：采用单侧肾切除、腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠模型，予以丹参药物干预。观察大鼠肾脏形态学及肾功能的变化。采用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应法检测转化生长因子β1（transforminggroinogenactivatorinhibitor1，PAI1）等细胞因子在糖尿病大鼠肾皮质中的表达水平。结果：与正常对照组比较，用药第8周末糖尿病肾病模型组大鼠的肾脏肥大指数
2、、平均肾小球体积、尿白蛋白排泄率、肌酐清除率均有明显升高（P＜0.05)，肾皮质TGFβ1、CTGF、PAI1和纤维连接蛋白的表达水平也有显著增高（P＜0.05)。丹参治疗组大鼠的上述指标与糖尿病肾病模型组比较，则有明显的降低（P＜0.05)。结论：丹参可通过抑制TGFβ1、CTGF、PAI1等细胞因子的表达，从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。 ［关键词］链脲霉素糖尿病;丹参;转化生长因子β1;结缔组织生长因子;纤溶酶激活物抑制物1 ProtectiveeffectsofSalviamiltiorrhizaonratsechanism LIUGang,G
3、UANGuangJu,QITongGang,FUYuQin,LIXueGang,SUNYun,olecularBiology,SecondHospital,ShandongUniversity,Jinan,ShandongProvince250033,China) ABSTRACTObjective:ToexploretheeffectsofSalviamiltiorrhizaonrenalmorphologyandrenalfunctionofratsale）常见的并发症。在西方国家，DN已成为导致终末期肾病的首要原因［1］。丹参（Salviamilti
4、orrhiza）对糖尿病肾病具有较好的治疗作用，但其作用机制尚不清楚。本研究通过观察转化生长因子β1（transforminggroinogenactivatorinhibitor1,PAI1）等细胞因子在DN大鼠肾脏中的表达及其与肾脏结构和功能改变之间的关系，探讨丹参对肾脏保护作用的机制。 1材料和方法 1.1动物分组及模型建立30只清洁级雄性oloney小鼠白血病病毒逆转录酶1μl，总体积20μl。采用ABIPRISM7000SDS进行实时PCR检测。TGFβ1、CTGF、PAI1、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）与3磷酸甘油醛脱氢酶（g
5、lyseraldehyde3phosphatedehydrogenase,GAPDH）引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，见表1。 表1PCR引物（略） Tab1PrimersforquantitativerealtimePCR PCR反应体系：5×SYBRGreenPCR缓冲液2μl，dNTP0.5μl，MgCl28μl，AmpliTaqGlod0.25μl，目的基因上、下游引物各2μl，逆转录产物2μl，总体积25μl。PCR参数：预变性94℃×2min；94℃×15s、55℃×30s、72℃×45s，共50个循环。结果用目的基因与内参GA
6、PDH的比值表示。 1.3.3肾组织病理学检查每张PAS染色切片在光镜下（×200）随机选取30个肾小球，用HPIAS1000彩色图像分析系统测定肾小球截面积。肾小球体积＝1.25×肾小球截面积3/2。 1.4统计学方法采用SPSS10.0软件进行统计学分析，计量资料均数用x±s表示，组间比较采用方差分析和q检验。 2结果 2.1一般情况的比较实验期间，DN模型组和丹参治疗组各有1只大鼠因血糖过高、感染等原因而死亡，未纳入最后统计。DN模型组和丹参治疗组大鼠较正常对照组体质量减轻、血糖升高，差异有统计学意义（P＜0.05)。表明DN大鼠模型复制成功。
7、DN模型组和丹参治疗组大鼠体质量、血糖比较无统计学差异，表明丹参对DN大鼠的体质量、血糖没有影响。见表2。.L.编辑。 2.2肾脏形态学与肾功能变化的比较与正常对照组比较，DN模型组大鼠肾脏肥大指数（kidneytobodyerularvolume,VG）、UAER、Ccr均有明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），为早期DN的特征表现。丹参治疗组大鼠K）沉积是DN特征性的病理改变。合成与降解失衡是造成ECM积聚的主要原因［2］。许多细胞因子参与了这一病理过程，并在DN的发生发展过程中起着非常重要的作用［3］。其中TGFβ在ECM的积聚中起关键作用。C
8、TGF被认为是介导TGFβ促纤维化活性的下游效应因子
