丹参对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究论文

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1、丹参对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究论文柳刚,关广聚,亓同钢,傅余芹,李学刚,孙云,吴涛,文蓉珠【关键词】链脲霉素糖尿病[摘要]目的:探讨丹参对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:采用单侧肾切除、腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠模型,予以丹参药物干预。观察大鼠肾脏形态学及肾功能的变化。采用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应法检测转化生长因子β1(transforminggroinogenactivatorinhibitor1,PAI1)等细胞因子在糖尿病大鼠肾皮质中的表达水平。结果:与正常对照组比较

2、,用药第8周末糖尿病肾病模型组大鼠的肾脏肥大指数、平均肾小球体积、尿白蛋白排泄率、肌酐清除率均有明显升高(P<0.05),肾皮质TGFβ1、CTGF、PAI1和纤维连接蛋白的表达水平也有显著增高(P<0.05)。丹参治疗组大鼠的上述指标与糖尿病肾病模型组比较,则有明显的降低(P<0.05)。结论:丹参可通过抑制TGFβ1、CTGF、PAI1等细胞因子的表达,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。[关键词]链脲霉素糖尿病;丹参;转化生长因子β1;结缔组织生长因子;纤溶酶激活物抑制物1Protectiveeffects

3、ofSalviamiltiorrhizaonratsechanismLIUGang,GUANGuangJu,QITongGang,FUYuQin,.freelentofNephrology,SecondHospital,ShandongUniversity,Jinan,ShandongProvince250033,China;LaboratoryofMolecularBiology,SecondHospital,ShandongUniversity,Jinan,ShandongProvince250033,C

4、hina)ABSTRACTObjective:ToexploretheeffectsofSalviamiltiorrhizaonrenalmorphologyandrenalfunctionofratsale)常见的并发症。在西方国家,DN已成为导致终末期肾病的首要原因[1]。丹参(Salviamiltiorrhiza)对糖尿病肾病具有较好的治疗作用.freelinggroinogenactivatorinhibitor1,PAI1)等细胞因子在DN大鼠肾脏中的表达及其与肾脏结构和功能改变之间的关系,探讨丹参

5、对肾脏保护作用的机制。1材料和方法1.1动物分组及模型建立30只清洁级雄性oloney小鼠白血病病毒逆转录酶1μl,总体积20μl。采用ABIPRISM7000SDS进行实时PCR检测。TGFβ1、CTGF、PAI1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)与3磷酸甘油醛脱氢酶(glyseraldehyde3phosphatedehydrogenase,GAPDH)引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成,见表1。表1PCR引物(略)Tab1PrimersforquantitativerealtimeP

6、CRPCR反应体系:5×SYBRGreenPCR缓冲液2μl,dNTP0.5μl,MgCl28μl,AmpliTaqGlod0.25μl,目的基因上、下游引物各2μl,逆转录产物2μl,总体积25μl。PCR参数:预变性94℃×2min;94℃×15s、55℃×30s、72℃×45s,共50个循环。结果用目的基因与内参GAPDH的比值表示。1.3.3肾组织病理学检查每张PAS染色切片在光镜下(×200)随机选取30个肾小球,用HPIAS1000彩色图像分析系统测定肾小球截面积。肾小球体积=1.25×肾小球截面

7、积3/2。1.4统计学方法采用SPSS10.0软件进行统计学分析,计量资料均数用x±s表示,组间比较采用方差分析和q检验。2结果2.1一般情况的比较实验期间,DN模型组和丹参治疗组各有1只大鼠因血糖过高、感染等原因而死亡,未纳入最后统计。DN模型组和丹参治疗组大鼠较正常对照组体质量减轻、血糖升高,差异有统计学意义(P<0.05)。表明DN大鼠模型复制成功。DN模型组和丹参治疗组大鼠体质量、血糖比较无统计学差异,表明丹参对DN大鼠的体质量、血糖没有影响。见表2。2.2肾脏形态学与肾功能变化的比较与正常对照组比较

8、,DN模型组大鼠肾脏肥大指数(kidneytobodyerularvolume,VG)、UAER、Ccr均有明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),为早期DN的特征表现。丹参治疗组大鼠K)沉积是DN特征性的病理改变。合成与降解失衡是造成ECM积聚的主要原因[2]。许多细胞因子参与了这一病理过程,并在DN的发生发展过程中起着非常重要的作用[3]。其中TGFβ在ECM的积聚中起关键作用。CTGF被认

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