广西地方标准《葡萄中白藜芦醇含量的测定液相色谱法》

《广西地方标准《葡萄中白藜芦醇含量的测定液相色谱法》》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、ICSDB45广西壮族自治区地方标准DB45/TXXXXX—2012葡萄中白藜芦醇含量的测定液相色谱法TestingresveratrolofgrapeLiquidchromatographyanalysis（征求意见稿）2012-XX-XX发布2012-XX-XX实施广西壮族自治区质量技术监督局发布DB45/XXXXX—2012前言本标准根据GB/T1.1-2009要求进行编写。本标准由广西大型仪器协作共用管理委员会办公室提出并归口。本标准由广西壮族自治区分析测试研究中心起草。本标准主要起草人：周琳、陈秋虹、莫建光。本标准为首次发布。3DB45/XXXXX—

2、2012葡萄中白藜芦醇含量的测定液相色谱法1　范围本标准规定了液相色谱法测定白藜芦醇含量的方法原理，使用仪器与设备、测定方法及结果计算。本标准适用于葡萄中白藜芦醇含量的测定。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法JY/T024高效液相色谱法通则3　方法原理葡萄采用匀浆后加无水硫酸钠干燥处理，葡萄中的白藜芦醇经乙酸乙酯提取，旋转蒸干，

3、用甲醇定容，高效液相色谱仪测定，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。4　试剂和材料4.1　一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682-2008中规定的三级水；流动相用水应符合GB/T6682中一级水的规定。所述溶液如未指明溶剂，均系水溶液；所用制剂和制品按GB/T603配制。4.2　试剂4.2.1　乙腈：色谱纯。4.2.2　甲醇：分析纯。4.2.3　乙酸乙酯：分析纯。4.2.4　无水硫酸钠：分析纯。4.2.5　乙酸：分析纯。4.2.6　乙酸溶液0.1％（V/V）：量取1mL冰醋酸，加水至1000mL。。4.2.7　白藜芦

4、醇标准品（分子式C14H12O3）：含量≥99％。4.3　白藜芦醇标准溶液精密称取白藜芦醇标准品10.0mg于10mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。制成1.00mg/mL的标准储备溶液，白藜芦醇标准工作液临用前配置，用甲醇稀释至20.0µg/mL。3DB45/XXXXX—20121　仪器与设备1.1　液相色谱仪带紫外检测器，其灵敏度及稳定性符合JY/T024-1996第6章要求。1.2　液相色谱工作站或色谱数据处理机。1.3　微量进样器：25μL或100μL。1.4　均质分散器。1.5　恒温振荡器。1.6　旋转蒸发器1.7　分析天平：感量0.0001g

5、。2　测定步骤2.1　提取取新鲜葡萄用分散器搅成匀浆，精确称取样品5.0000g（精确至0.0001g），加入无水硫酸钠研磨至干燥均匀分散，置磨口三角瓶中用乙酸乙酯50mL在40℃恒温下振摇提取30min，反复提取三次。合并乙酸乙酯提取液，减压蒸干，用甲醇溶解残留物，至5mL棕色量瓶定容。摇匀，滤过，滤液用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液作为供试品溶液。分别取供试品溶液与白藜芦醇标准工作液（4.3）各20µL注入液相色谱仪。2.2　液相色谱条件2.2.1　色谱柱：C18(4.6mm×250mm，5μm)：或性能相当的色谱柱。2.2.2　柱温：25℃。2.

6、2.3　流动相：取0.1％（V/V）乙酸溶液750mL加入250mL乙腈2.2.4　流动相流速：1.0mL/min。2.2.5　检测波长：306nm。2.2.6　检测灵敏度：1AUFS。2.3　测定　　外标法分析测定。分别吸取10μL标准溶液和样品溶液上机进行色谱分析。标准溶液及样品重复进样，所得峰面积（或峰高）平均偏差小于3%。2.4　液相色谱图（见图1）3　结果计算和表达3.1　计算公式试样中白藜芦醇的含量X，以质量分数毫克每百克（mg/100g）表示，按照公式（1）计算：.......................................（1）

7、式中：V——试样溶液定容体积，mL；As——试样溶液对应的色谱峰面积响应值；3DB45/XXXXX—2012Asd——白藜芦醇标准溶液对应的色谱峰面积响应值；ρ——白藜芦醇标准溶液的含量，µg/mL；m——试样的质量，g。1.1　结果表示平行测定结果用算术平均值表示，结果保留三位有效数字。2　重复性在重复条件下获得的两次独立测定结果的相对偏差不得超过算术平均值的10%。图1、白藜芦醇HPLC色谱图3