姜黄素对神经病理性痛大鼠脊髓背角cfos表达的

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1、姜黄素对神经病理性痛大鼠脊髓背角cfos表达的【摘要】［目的］观察姜黄素对神经病理性痛大鼠痛行为及脊髓背角原癌基因cfos表达的影响。［方法］采用大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）模型。雄性SD大鼠108只，随机分为实验对照组、假手术组、溶剂对照组、姜黄素组。采用vonFrey纤维丝和热痛刺激仪测定大鼠热痛缩爪潜伏期（Tethods］108maleSDratslydividedinto4groups:Controlgroup(treatedoperationgroup;Solventcontrastgroup;Curcumintreatedgroup.Thermal

2、echanicalinedbyHargreave’sthermalradiationapparatusandvonFrey’smethodofmicrofilament，respectively.Thetimecourseofexpressionofcfosmunohistochemicalanalysis.［Results］CurcumincouldsignificantlyattenuatetheactivationofcfosinducedbyCCIandsimultaneouslyamelioratethermalandmechanicalhyperalges

3、iainducedbyCCI.［Conclusion］ThisstudyshoincouldattenuatetheactivationofcfostoamelioratetheCCIinducedneuropathicpain.　　Keyin;cfos;neuralgia;spinalcord;rat　　神经病理性痛主要表现为痛觉过敏（包括热痛敏和机械痛敏两种类型），由于其机制复杂，现有的疼痛治疗方法均无显著疗效，给患者带来了极大的痛苦，因而成为疼痛学研究的热点。有研究表明，细胞外信号调节激酶和JNK参与了神经病理性痛的信号转导［1］。姜黄素具有痛经止痛的作用，又

4、是一抗炎、抗肿瘤药物,同时又可抑制JNK［2］。本研究通过动态观察姜黄素腹腔注射后对CCI模型大鼠的行为学及脊髓背角原癌基因cfos表达的变化，旨在探讨姜黄素对于神经病理性痛的作用及其可能机制。　　1材料与方法　　1.1实验动物及试剂雄性SD大鼠，体重200～280g，由温州医学院实验动物中心提供［实验动物使用许可证编号：SYXK(浙2005-0061)］。兔抗cfosIgG多抗（产品标号：sc52），为美国SantaCruz公司产品，姜黄素购自美国Sigma公司。姜黄素用二甲基亚砜溶解配置成30、100、300mg/kg贮存液，避光于4℃冰箱保存。　　1.2模型制

5、备神经病理性痛模型参照Bent和Xie方法［3］建立CCI模型。1%戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉。在大腿中点通过股二头肌钝性分离并暴露坐骨神经，接近三股分叉处，游离神经约7mm，松松结扎4道(4.0铬肠线)，结扎强度以引起小腿肌肉轻度颤动为宜，相隔lmm，受影响神经长4～5mm，缝合肌肉皮肤。假手术组大鼠仅暴露坐骨神经不进行结扎。　　1.3实验分组雄性SD大鼠108只，随机分为6组，每组6只。实验对照组（Con），不给予任何药物；假手术组（Sham），大鼠游离右侧坐骨神经但不结扎；溶剂对照组(SC)，腹腔注射二甲基亚砜；姜黄素组（Cur30）、（Cur100）、（

6、Cur300）分别术后每天腹腔注射30、100、300mg/kg的姜黄素。　　1.4行为学测定坐骨神经松扎前连续测定大鼠缩足行为2d,然后从造模后d1、d3、d5、d7、d10、d14分别采用热辐射法（热痛觉过敏）［4］和vonFrey细丝法（机械性痛觉过敏）［5］测定热刺激缩足反射潜伏期（Tin后用一系列标准化的纤维丝vonFrey(美国Stoelting公司产品)刺激后肢足底中部,如大鼠在刺激时间内或移开vonFrey纤维丝时出现快速缩足或舔足反应为阳性反应,每次间隔30s,以15g为上限热辐射法即按Hargreaves方法，将大鼠置于底为3mm厚玻璃板的有机玻璃箱(

7、22cm×12cm×22cm)中,使其适应30min后用热辐射刺激仪(50m光斑照射大鼠足底,记录从照射开始至大鼠出现抬腿回避时间即为Tin,取平均值为Tg/kg麻醉下,经主动脉灌注生理盐水100mL,继而灌注4%多聚甲醛400ml，制作SD大鼠L4-5脊髓、背根神经节石蜡切片，54℃恒温水浴展开，晾干备用。60℃烤片至石蜡溶解，二甲苯梯度酒精脱蜡。抗原高压热修复，枸橼酸修复液（pH6.0）煮至微沸，放入切片，喷气10min，离开热源自来水流水冷却。3％过氧化氢封闭10min，滴加1∶100的一抗，4℃孵育24h，取出后室温复