蛋白酶激活受体2激动剂诱导上皮细胞分泌mcp

《蛋白酶激活受体2激动剂诱导上皮细胞分泌mcp》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、蛋白酶激活受体2激动剂诱导上皮细胞分泌MCP【关键词】蛋白酶激活受体　　【Abstract】AIM:Toinvestigatetheactionsofagonistsofproteinaseactivatedreceptors(PAR)2onthesecretionofmonocytechemoattractantprotein1(MCP1)fromhumanlungepithelialcells.METHODS:A549cellsedbyaddingvariousconcentrationsofPAR2agonistsortheirreversepeptidesinto

2、eachinatedbyremovalofthesupernatantfromeachinethelevelsofMCP1insupernatants.RESULTS:Folloide(SLIGKV)andtranscinnamoylLeuIleGlyArgLeuOrnamide(tcLIGRLO)aximumreleaseofMCP1orethanthebaselinerelease.ThereversePAR2agonistshadlittleeffectsonMCP1release.Thetimecourseshoculturedhumanlungepithelia

3、lcells.Theirantagonistsmaypossesstheabilitytoinhibitairmation.　　【Keyonocytechemoattractantprotein1　　【摘要】目的：探讨蛋白酶激活受体（PAR）2激动剂对人上皮细胞单核细胞趋化蛋白1（MCP1）分泌的影响.方法：人肺上皮细胞系A549细胞分别接种于12孔培养板各孔内，并分别用不同浓度的PAR2激动剂，反PAR2激动剂进行刺激.刺激时间为2,8和16h.用ELISA方法检测上清液中的MCP1水平.结果：经过16h的培养，PAR2激动剂SLIGKV和tcLIGRLO均可引起浓度相

4、关性MCP1释放增加，tcLIGRLO引起的最大MCP1释放量达基础分泌量的13倍.反PAR2激动剂对MCP1释放的影响较小.时间相关曲线表明，PAR2激动剂的作用从2h开始，16h达高峰.结论：PAR2激动剂是高效的人肺上皮细胞MCP1的促分泌剂.其拮抗剂有可能具有抑制呼吸道炎症的作用.　　【关键词】蛋白酶激活受体；上皮细胞系；单核细胞趋化蛋白1　　0引言　　上皮细胞可释放许多前炎因子［1］,作为首先接触吸入性抗原的呼吸道上皮细胞，能够释放许多与炎症性疾病密切相关的细胞因子，如MCP1，IL1，IL6，IL8，GMCSF，MIP，RANTES和eotaxin等［2］.最

5、近发现在呼吸道上皮细胞上有PARs的表达［3］，提示在呼吸道上皮细胞的PARs和白介素分泌间可能有某种联系.由于PAR2激活被发现与某些呼吸道炎症性疾病有关［4］，因此，我们利用培养的人肺癌上皮细胞系A549细胞探讨PAR2激动剂对上皮细胞MCP1释放的影响.　　1材料和方法　　1.1材料　　PAR2激动剂SLIGKV，tcLIGRLO和反PAR2激动剂VKGILS，tcOLRGIL由美联生物科技有限公司（西安）合成;青链霉素(Sigma公司);DMEM培养液、胎牛血清（FBS）、胰蛋白酶EDTA消化液均购自Gibco公司.　　1.2方法　　人肺癌上皮细胞系A549细胞（

6、购自中国科学院上海细胞研究所）接种于50mL培养瓶内，用DMEM完全培养液（含100mL/LFBS，100mg/L青/链霉素），于37℃,50mL/LCO2培养箱中培养.待细胞铺满瓶底后，用2.5g/L胰蛋白酶EDTA消化液消化，将获得的细胞分种于12孔培养板各孔内，用1mL完全培养液培养至细胞相互融合后，换无血清培养液培养16h.分5组：SLIGKV，tcLIGRLO，VKGILS，tcOLRGIL各1组和激发对照组.激发实验向每孔内加0.1～100μmol/L4种浓度的PAR2激动剂或反PAR2激动剂，每种药物浓度重复2孔,分别培养2,8和16h后收获上清液-80℃冻

7、存,用于ELISA检测.每组实验重复5次.人MCP1检测用人MCP1ELISA检测试剂盒（Biosource）,检测上清液MCP1水平，并用酶标仪于450nm波长处测定吸光度A值.统计学处理:全部统计分析均采用SPSS(11.0版)软件分析，数据以x±s表示.所用统计方法为单因素方差分析（onewayANOVA），组间方差不齐时，两两比较采用Dunt’sT3检验；方差齐时，采用最小显著差法.P<0.05为统计学上有显著性差异.2结果　　培养16h，PAR2激动剂SLIGKV和tcLIGRLO均可引起浓度相关性MCP1释放