蛋白酶激活受体2激动剂诱导上皮细胞分泌mcp论文

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1、蛋白酶激活受体2激动剂诱导上皮细胞分泌MCP论文【关键词】蛋白酶激活受体【Abstract】AIM:Toinvestigatetheactionsofagonistsofproteinaseactivatedreceptors(PAR)2onthesecretionofmonocytechemoattractantprotein1(MCP1)fromhumanlungepithelialcells.METHODS:A549cellsedbyaddingvariousconcentrationsofPAR2ag

2、onistsortheirreversepeptidesintoeachinatedbyremovalofthesupernatantfromeachinethelevelsofMCP1insupernatants.RESULTS:Folloide(SLIGKV)andtranscinnamoylLeuIleGlyArgLeuOrnamide(tcLIGRLO)aximumreleaseofMCP1orethanthebaselinerelease.ThereversePAR2agonistshadlittl

3、eeffectsonMCP1release.Thetimecourseshoculturedhumanlungepithelialcells.Theirantagonistsmaypossesstheabilitytoinhibitairmation.【Keyonocytechemoattractantprotein1【摘要】目的：探讨蛋白酶激活受体（PAR）2激动剂对人上皮细胞单核细胞趋化蛋白1（MCP1）分泌的影响.方法：人肺上皮细胞系A549细胞分别接种于12孔培养板各孔内，并分别用不同浓度的PAR2激

4、动剂，反PAR2激动剂进行刺激.刺激时间为2,8和16h.用ELISA方法检测上清液中的MCP1水平.结果：经过16h的培养，PAR2激动剂SLIGKV和tcLIGRLO均可引起浓度相关性MCP1释放增加，tcLIGRLO引起的最大MCP1释放量达基础分泌量的13倍.反PAR2激动剂对MCP1释放的影响较小.时间相关曲线表明，PAR2激动剂的作用从2h开始，16h达高峰.结论：PAR2激动剂是高效的人肺上皮细胞MCP1的促分泌剂.其拮抗剂有可能具有抑制呼吸道炎症的作用.【关键词】蛋白酶激活受体；上皮细胞系；单

5、核细胞趋化蛋白10引言上皮细胞可释放许多前炎因子［1］,作为首先接触吸入性抗原的呼吸道上皮细胞，能够释放许多与炎症性疾病密切相关的细胞因子.freela公司);DMEM培养液、胎牛血清（FBS）、胰蛋白酶EDTA消化液均购自Gibco公司.1.2方法人肺癌上皮细胞系A549细胞（购自中国科学院上海细胞研究所）接种于50mL培养瓶内，用DMEM完全培养液（含100mL/LFBS，100mg/L青/链霉素），于37℃,50mL/LCO2培养箱中培养.待细胞铺满瓶底后，用2.5g/L胰蛋白酶EDTA消化液消化，将获

6、得的细胞分种于12孔培养板各孔内，用1mL完全培养液培养至细胞相互融合后，换无血清培养液培养16h.分5组：SLIGKV，tcLIGRLO，VKGILS，tcOLRGIL各1组和激发对照组.激发实验向每孔内加0.1～100μmol/L4种浓度的PAR2激动剂或反PAR2激动剂，每种药物浓度重复2孔,分别培养2,8和16h后收获上清液-80℃冻存,用于ELISA检测.每组实验重复5次.人MCP1检测用人MCP1ELISA检测试剂盒（Biosource）,检测上清液MCP1水平，并用酶标仪于450nm波长处测定吸

7、光度A值.统计学处理:全部统计分析均采用SPSS(11.0版)软件分析，数据以x±s表示.所用统计方法为单因素方差分析（oneol/L时就可引起MCP1释放增加，增加到100μmol/L时诱导MCP1的释放量比基础分泌量增加了13倍.反PAR2激动剂tcOLRGIL在浓度为10μmol/L时也能引起MCP1释放增加，但与同浓度的tcLIGRLO相比，诱导MCP1的释放量较少.SLIGKV在1μmol/L时也可引起MCP1分泌增加，但它的作用强度比tcLIGRLO要弱，两者间有显著差异(P0.05).反PAR2

8、激动剂VKGILS对MCP1的释放无影响（Fig1）.tcLIGRLO与A549细胞培养2,8和16h显示，随着药物作用时间的延长，MCP1释放量显著增加(P0.05)，反PAR2激动剂tcOLRGIL随药物作用时间的延长，MCP1释放量也有少量增加（Tab1）.SLIGKV引起MCP1释放也随时间而增加(P0.05）.3讨论PARs属G蛋白耦联受体家族中的亚类，目前有PAR1,.freelRNA的